Amplite 比色法醛类定量试剂盒

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产品优势

1.快速稳定：可在96孔或384孔微孔板中便捷完成，无需分离步骤，易于实现自动化操作；

2.在100 µL检测体系中可检测低至1纳摩尔（10 µM）的醛类物质

 

适用范围

用于醛类定量

 

产品介绍

快速精准的醛类检测在生物研究、食品工业、化学研究和环境污染监测等领域具有重要意义。目前市场上可用的醛类定量试剂或检测试剂盒十分有限，现有检测方法大多基于高效液相色谱-质谱联用（HPLC-MS）或气相色谱-质谱联用（GC-MS）等繁琐且昂贵的分离技术。

Amplite®比色法醛类定量检测试剂盒采用独家专利染料，该染料与醛类反应后可生成显色产物。本试剂盒提供了一种高灵敏度的单步比色检测方案，在100 µL检测体系中可检测低至1纳摩尔（10 µM）的醛类物质。该检测可在96孔或384孔微孔板中便捷完成，无需分离步骤，易于实现自动化操作。检测信号可通过酶标仪在550 nm波长处直接读取。

 

适用仪器

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光吸收酶标仪
吸收:	550nm
推荐孔板:	透明底板

标准操作流程

简要概述

1.准备醛类标准品和/或测试样品（50 µL）

2.加入2× AldeView™ Yellow工作液（50 µL）

3.室温孵育30至60分钟

4.监测550 nm处吸光度变化

 

储备溶液制备

除非特别说明，所有未使用的储备液应分装为单次使用量，配制后保存于-20°C，避免反复冻融。

醛类标准品溶液（10 mM）

向醛类标准品（组分C）瓶中加入1 mL稀释缓冲液（组分D），配制成10 mM醛类标准品溶液。

 

标准品梯度稀释

推荐使用在线稀释计算工具：https://www.aatbio.com/tools/serial-dilution/10051

 

操作步骤

1.取10 mM醛类标准品溶液，按1:10比例稀释获得1000 µM标准品溶液（AS7）；

2.继续按1:3梯度稀释，依次获得AS6至AS1系列标准品溶液。

 

工作液配制

向AldeView™ Yellow（组分A）瓶中加入5 mL检测溶液（组分B），混匀。

注意：

1.  5 mL 2× AldeView™ Yellow反应混合液可满足1块微孔板检测需求；

2.  反应混合液稳定性较差，需在2小时内使用；

3. 检测溶液（组分B）具有潜在危险性，操作时请佩戴手套；

 

样品分析

表1.白色/透明底96孔微孔板中的醛标准品和测试样品的布局。 AS =醛标准品（AS1-AS7,1至1000μM），BL =空白对照，TS =测试样品。

BL	BL	TS	TS
AS1	AS1	...	...
AS2	AS2	...	...
AS3	AS3
AS4	AS4
AS5	AS5
AS6	AS6
AS7	AS7

表2.每个孔的试剂组成

孔	容积	试剂
AS1-AS7	50ul	连续稀释（1至1000μM）
BL	50ul	分析缓冲液
TS	50ul	测试样本

1.样品准备

按照表1和表2提供的布局，准备以下溶液：醛类标准品（AS）、空白对照（BL）、测试样品（TS）

注意事项：

384孔板：每孔加入25 µL试剂（而非50 µL）

干扰物质：BSA和Tween 20会影响检测结果，样品中BSA浓度需低于0.001%，Tween 20浓度需低于0.01%。

2.酶反应样品处理（如适用）

若醛类样品来源于酶反应（如果糖-1,6-二磷酸与果糖-1,6-二磷酸醛缩酶的反应）：准备50 µL酶反应体系（384孔板用25 µL）；37°C孵育至少1小时；根据需要优化反应组分（如特定酶反应可能需要专用缓冲体系）。

说明：若无专用缓冲液，可直接使用稀释缓冲液（组分D）进行酶反应。

3.加入工作液

向每孔（含标准品、空白对照或测试样品）中加入：96孔板：50 µL AldeView™ Yellow工作液（总检测体积100 µL/孔）；384孔板：25 µL AldeView™ Yellow工作液（总检测体积50 µL/孔）。

4. 室温避光孵育30-60分钟；

5.用酶标仪监测550 nm处吸光度变化。

注意：不同浓度的醛类可能与AldeView™ Yellow形成不同颜色，需通过吸光度定量。