Amplite 比色法氨定量试剂盒

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产品优势

1.兼容96孔板或384孔板格式

2.无需分离步骤即可实现自动化操作需分离步骤即可实现自动化操作

适用范围

用于氨定量检测

产品介绍

氨是生命体重要的氮源物质，通过氨基酸代谢途径合成，但在高浓度时具有神经毒性。肝脏是氨代谢的主要器官，通过尿素循环将其转化为尿素排出体外。在临床检测中，血液氨浓度异常具有重要诊断价值：高氨血症（hyperammonemia）常见于肝硬化等肝功能异常；而低氨血症（hypoammonemia）则多提示尿素循环酶（如鸟氨酸氨甲酰转移酶）缺陷。因此，氨浓度检测已成为临床实验室评估机体健康状况的常规指标。

针对这一检测需求，我们开发的Amplite®比色法氨检测试剂盒提供了一种简便、灵敏的解决方案。该试剂盒采用专利的酶偶联反应原理：氨在检测缓冲液中经过系列酶促反应，最终生成蓝色产物，其颜色深度与样本中氨浓度成正比，可通过660-670nm波长进行比色测定。本产品适用于食品及血清、血浆、尿液等多种生物样本的检测。

该检测体系具有显著的技术优势：首先，采用"混合即读"（mix-and-read）的一步法操作流程，无需分离步骤即可实现自动化检测；其次，兼容96孔板和384孔板两种检测模式，可灵活适应不同通量的检测需求。这些特点使本试剂盒成为临床诊断和科研研究的理想选择。

适用仪器

标准实验方案

实验概述

1.准备氯化铵标准品/测试样本（50 µL/孔）

2.加入检测缓冲液I（50 µL/孔）

3.室温或37°C孵育5分钟

4.加入检测缓冲液II（50 µL/孔）

5.室温孵育30-60分钟

6.监测660-670 nm波长吸光度变化

标准溶液配制

氯化铵标准曲线制备

推荐使用在线稀释计算工具：https://www.aatbio.com/tools/serial-dilution/10059

1.将1μL1.0M氯化铵标准品（组分C）加入999μLDPBS中，生成1000μM氯化铵标准溶液（AS7）。

2.取1000μM氯化铵标准溶液（AS7），进行1：3连续稀释，得到连续稀释的氯化铵标准品（AS6-AS1）和DPBS。

样品分析

表1.在96孔微孔板中的氯化铵标准品和测试样品的布局。 AS =氯化铵标准品（AS1-AS7,1至1000μM），BL =空白对照，TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和2中提供的布局制备氯化铵标准品（AS），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向每个氯化铵标准品，空白对照和测试样品的孔中加入50μL测定缓冲液I（组分A），使总测定体积为100μL/孔。384孔板，在每孔中加入25μL测定缓冲液I，总体积为50μL/孔。

3.将反应在室温避光孵育5分钟。

4.向每个孔中加入50μL测定缓冲液II（组分B）以使总测定体积为150μL/孔。384孔板，每孔加入25μLAssayBuffer II，总体积为75μL/孔。

5.室温孵育反应30-60分钟。

6.用吸光度酶标仪在660-670nm处监测吸光度的增加。

注意：加入分析缓冲液II（组分B）后颜色变为黄色，含氯化铵标准品的孔或样品孵育后会显示蓝绿色。颜色的强度将在30-60分钟内达到大值。