Amplite 比色法丙二醇(MDA)定量试剂盒

货号10070存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格200 Tests价格4488
Ex (nm)695Em (nm)
分子量溶剂
产品详细介绍


简要概述

Amplite 比色法丙二醇(MDA)定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。丙二醛(MDA)是脂质过氧化的天然副产物,被广泛用作确定氧化应激和自由基形成的关键指标。 历史上,MDA的测量依赖于与硫代巴比妥酸(TBA)的反应,得到可以在532nm下比色测量或在Ex / Em = 530nm / 550nm下荧光测定的化合物。 但该测定不是MDA特异性的,也是在90-100℃的酸性条件下进行的。 已经有许多商业ELISA试剂盒,这使得它更加昂贵和繁琐。 Amplite 比色丙二醛(MDA)定量试剂盒提供了最快速,最方便的MDA测量方法,无需TBARS加热步骤。 MDA Blue 与MDA反应生成蓝色产物,用吸光度酶标仪在695nm处测量。 该测定法对MDA非常快速且特异,几乎不受其他醛的干扰。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 比色法丙二醇(MDA)定量试剂盒。 

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 695nm
推荐孔板: 透明底板


产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备测试样品和连续稀释的MDA标准品(50μL)
2.添加MDA Blue 原液(10μL)
3.在室温下孵育10-30分钟
4.加入反应溶液(40μL)
5.监测OD增加至695nm

 

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. MDA标准溶液(100 mM):
将100μLDdH2O加入MDA标准小瓶(组分C)中以制备100mM MDA储备溶液。

 

2.标准溶液

2.1MDA标准
将4μL100mMMDA标准品加入996μL稀释缓冲液(组分B)中,得到400μMMDA溶液(MDA7)。 然后在稀释缓冲液中进行1:2连续稀释,得到连续稀释的MDA标准品(MDA6-MDA1)。

  

样品分析

表1. 96孔透明底微孔板中MDA标准品和测试样品的布局。 MDA = MDA标准品(MDA1-MDA7,6.25至400μM),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
MDA1 MDA1 ... ...
MDA2 MDA2 ... ...
MDA3 MDA3    
MDA4 MDA4    
MDA5 MDA5    
MDA6 MDA6    
MDA7 MDA7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
MDA1-MDA7 50ul 连续稀释(6.25至400μM)
BL 50ul 稀释缓冲液(组分B)
TS 50ul 测试样品

1.根据表1和2中提供的布局制备MDA标准品(MDA),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.将10μLMDABlue (组分A)溶液加入MDA标准品,空白对照和测试样品的每个孔中。 对于384孔板,每孔使用5μLMDABlue 溶液。

3.将反应混合物在室温下孵育10-30分钟。

4.加入40μL反应溶液(组分D),使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,使用20μL反应溶液,总测定体积为50μL/孔。

5.将最终反应混合物在室温下孵育30-60分钟。

6.用吸光度板读数器监测吸光度增加,在OD为695~700nm时进行路径校正校正。

 

参考文献

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说明书
Amplite 比色法丙二醇(MDA)定量试剂盒.pdf