Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒

货号10071存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格200 Tests价格4488
Ex (nm)365Em (nm)435
分子量溶剂
产品详细介绍


简要概述

Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。丙二醛(MDA)和4-羟基壬烯醛(4-HNE)是脂质过氧化的天然副产物。 作为脂质过氧化最受欢迎和最可靠的生物标志物,MDA已被广泛用于确定临床情况下的氧化应激多年。 因此,MDA的量化对于评估病理生理过程中的氧化应激是必不可少的。 Amplite 荧光丙二醛(MDA)定量试剂盒提供了一种快速方便的方法来测量MDA,无需加热步骤,而这些步骤是其他供应商提供的商业MDA检测试剂盒所必需的。 Monoaldelite Blue本身几乎不发荧光,但在与MDA反应时会产生强烈的蓝色荧光。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒。 

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 365nm
发射: 435nm
cutoff: 420nm
推荐孔板: 黑色底板


产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备并添加MDA标准品或测试样品(50μL)
2.准备并添加MDA工作溶液(50μL)
3.在室温下孵育10至30分钟
4.加入反应溶液(25μL)
5.在室温下孵育30至60分钟
6.监测Ex / Em = 365 / 435nm处的荧光强度

 

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 MDA标准溶液(100 mM):
将100μLddH2 O加入到MDA标准品(组分C)的小瓶中以制备100mM MDA标准溶液。

1.2 Monoaldelite Blue原液(250X):
将20μLDMSO(组分E)加入一小瓶Monoaldelite Blue(组分A)中以制备Monoaldelite Blue原液。 注意:这种Monoaldelite Blue原液足以容纳一个96孔板。 它不稳定,请及时使用。

 

2.标准溶液

2.1MDA标准
将10μL的100mM MDA标准溶液加入990μL的测定缓冲液(组分B)中以产生1000μM的MDA标准溶液(MDA7)。 取1000μMMDA标准溶液(MDA7)并进行1:3连续稀释,得到连续稀释的MDA标准品(MDA6-MDA1)和分析缓冲液(组分B)。

 

3.工作溶液

Monoaldelite 蓝色:
将20μL250XMonoaldelite Blue储备溶液加入5 mL分析缓冲液(组分B)中并充分混合。

 

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中MDA标准品和测试样品的布局。 MDA = MDA标准品(MDA1-MDA7,1.37至1000μM),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
MDA1 MDA1 ... ...
MDA2 MDA2 ... ...
MDA3 MDA3    
MDA4 MDA4    
MDA5 MDA5    
MDA6 MDA6    
MDA7 MDA7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
MDA1-MDA7 50ul 连续稀释液(1.37至1000μM)
BL 50ul 分析缓冲液(组分B)
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局添加MDA标准品(MDA),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向MDA标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLMDA工作溶液,使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μLMDA工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应10-30分钟。

4.向每个孔中加入25μL反应溶液(组分D),使总测定体积为125μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入12.5μL反应溶液(组分D),总体积为62.5μL/孔。

5.在室温下孵育反应30-60分钟。

6.用Ex / Em = 365 / 435nm(截止= 420nm)的荧光板读数器监测荧光增加。

 

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说明书
Amplite 荧光法法丙二醇(MDA)定量试剂盒.pdf