Portelite 荧光蛋白定量试剂盒 优化用于 CytoCite 和Qubit 荧光分析仪

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适用范围

蛋白定量检测

 

产品介绍

蛋白质定量是蛋白质纯化、电泳、细胞生物学、分子生物学及其他研究应用中的核心环节。目前常规使用的二喹啉甲酸（Biuret）、Lowry、BCCA与Bradford法等比色检测方法存在灵敏度不足的局限，且需消耗大量样本以确保准确度。

Portelite™荧光法蛋白定量检测试剂盒具有显著更高的检测灵敏度——例如较Bradford法和BCA法提升显著。试剂盒采用的Prolite™橙色荧光染料在水溶液中无荧光，但与蛋白质结合后可快速产生强烈荧光信号。

Portelite™荧光法蛋白定量检测试剂盒为溶液中的蛋白质浓度定量提供了简便高效的检测方案，其动态检测范围可达12.5 μg/mL至5 mg/mL（以BSA为标准）。

Portelite™荧光法蛋白定量检测试剂盒已针对Cytocite™与Qubit™荧光检测系统进行专项优化，适用于以下应用场景：（1）蛋白质相互作用研究；（2）亲和层析后洗脱组分的浓度测定；（3）细胞提取物中膜蛋白回收率评估；（4）融合蛋白的高通量筛选。

 

适用仪器

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Qubit荧光计
Ex:	480nm
Em：	510-580nm
推荐孔板:	0.2 mL薄壁PCR管
CytoCite荧光计
Ex:	480nm
Em:	510-580nm
推荐孔板:	0.2 mL薄壁PCR管

Qubit®的简要说明书

荧光计

1.按Qubit®主屏幕主屏幕上的蛋白质，然后按读取标准。

2.将3个含有标准的试管中的每一个插入样品室。

3.关闭盖子，然后按读取标准。

4.仪器显示结果并生成校准曲线。

5.按Run samples并选择样品量至10μL。

6.将样品管插入样品室。

7.关闭盖子，然后按Read管。

8.仪器在化验屏幕上显示结果。 高值是原始样品浓度，低值是稀释浓度。

 

制备工作溶液

Prolite 橙色工作溶液：

将1μLProlite Orange（200X）

（组分A）加入199μL样品稀释液中

缓冲液（组分E）并将它们充分混合。

注：请勿将工作溶液混入玻璃容器中

 

实验步骤

运行蛋白质测定

1.将190μL/孔的Prolite Orange工作溶液加入每个试管中。

注意使用薄壁，聚丙烯，透明0.5 mL PCR管，如Invitrogen Qubit®

分析管（Cat＃Q32856）或Axygen PCR-05-C管（VWR，Cat＃10011-830）。其他类型的管可以具有自动荧光和可能会干扰检测。

2.将10μLBSA标准品（组分B，C，D）或10μL样品加入190μL中

Prolite 橙色工作溶液管使终测定体积为200μL/管。

3.在室温下孵育反应15分钟。

注意保护样品避光，避免将样品放在手中。

4.将样品插入Qubit®并在Ex / Em =485/590 nm处监测荧光