Amplite 比色法酪胺酸检测试剂盒
| Ex (nm) | - | Em (nm) | - |
| 分子量 | N/A | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
产品货期
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产品优势
专为酶标仪检测设计，可实现快速、准确的活性分析
适用范围
用于酪氨酸酶检测
产品介绍
酪氨酸酶因其在黑色素生物合成途径中的关键作用，已成为药物研发、生命科学研究、食品及化妆品行业的重要研究对象。酪氨酸酶抑制剂的开发与筛选对黑色素瘤相关疾病的治疗具有重要意义——该酶在黑色素瘤中的表达水平及活性显著上调，被视为监测相关疾病的可靠指标。
AAT Bioquest公司开发的Amplite®比色法酪氨酸酶检测试剂盒提供了一种操作简便、一步完成且高灵敏度的酪氨酸酶活性检测方案。该试剂盒采用专用无色底物溶液，与酪氨酸酶反应后在510 nm波长处产生显著增强的吸光信号，其吸光度变化与酪氨酸酶活性呈良好相关性。本试剂盒专为酶标仪检测设计，可实现快速、准确的活性分析。
样品实验方案
简要概述
1.准备和添加标准品和样品（50μL）
2.准备并添加酪氨酸酶蓝工作溶液到标准品和样品孔（50μL）
3.将板在室温下孵育60至120分钟
4.检测510nm处的吸光度
溶液制备
1.储备溶液
所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1酪氨酸酶原液（2000 U / mL）：
将120μL测定缓冲液（组分B）加入酪氨酸酶标准品（组分A）中并充分混合。 注意：将未使用的酪氨酸酶原液储存在-20°C，一次性使用等分试样。
1.2酪氨酸酶蓝原液（100X）：
将50μLDMSO（组分D）加入酪氨酸酶蓝（组分C）中并充分混合。 注意：将未使用的酪氨酸酶蓝原液在-20°C下以一次性等分试样储存。
2.标准溶液
酪氨酸酶标准
使用酪氨酸酶原液（2000 U / mL）和测定缓冲液产生400 U / mL终浓度的酪氨酸酶标准溶液（T1）。 然后进行1：2连续稀释以获得剩余的连续稀释的酪氨酸酶标准品（T2-T7）。 注意：井中标准品的终浓度为2X。 注意：使用提供的标准，如果使用建议的浓度，可以重复生成2条标准曲线。
3.工作溶液
酪氨酸酶蓝工作溶液：
通过将5μL酪氨酸酶蓝原液（100X）加入1mL测定缓冲液（组分B）中进行1：100稀释并充分混合。
样品分析
| T1 | T1 | TS | TS |
| T2 | T2 | ||
| T3 | T3 | ||
| T4 | T4 | ||
| T5 | T5 | ||
| T6 | T6 | ||
| T7 | T7 | ||
| T8 | T8 |
表1.酪氨酸酶标准品和测试样品在白色透明底部 96 孔微孔板中的布局。酪氨酸酶标准品（T1-T7= 400 至 6.25 U/mL），TS= 测试样品，BL= 空白样品
1.按照检测缓冲液中的建议准备标准品和测试样品，并在微孔板中添加各 50 µL。
2.将 50 µL 酪氨酸酶底物工作溶液添加到标准品和样品的孔中。
3.将反应物在室温下孵育 30 至 60 分钟。
4.使用吸光度酶标仪在 510 nm 处监测吸光度。
