Amplite 荧光法乙酰胆碱检测试剂盒 红色荧光

货号11403存储条件f/l
规格200 Tests价格2460
Ex (nm)570Em (nm)583
分子量溶剂
产品详细介绍


简要概述

        Amplite 荧光法乙酰胆碱检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测乙酰胆碱酯酶的试剂盒,胆碱是一种强有机碱,是卵磷脂的组成成分,也存在于神经鞘磷脂之中,是机体可变甲基的一个来源而作用于合成甲基的产物,同时又是乙酰胆碱的前体。乙酰胆碱(AcetylCholine,ACh)是一种神经递质,能特异性的作用于各类胆碱受体,在组织内迅速被胆碱酯酶破坏,其作用广泛,选择性不高。在神经细胞中,乙酰胆碱是由胆碱和乙酰辅酶A在胆碱乙酰移位酶(胆碱乙酰化酶)的催化作用下合成的。胆碱和乙酰胆碱在许多生物学过程中发挥重要的作用。Amplite乙酰胆碱检测试剂盒 *红色荧光* 为定量检测胆碱提供了一种最灵敏的方法。本试剂盒使用Amplite Red对氧化酶介导的酶偶联反应产物胆碱进行定量检测。Amplite Red的红色荧光强度与胆碱的量成比例关系。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法乙酰胆碱检测试剂盒。

点击查看光谱



产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备ACh工作溶液(50μL)
2.添加ACh标准品或ACh测试样品(50μL)
3.在室温下孵育10-30分钟
4.监测Ex / Em = 540/590 nm处的荧光强度(截止= 570 nm)

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. Amplite 红色储备液(250X):
将40μLDMSO(组分E)加入到Amplite Red(组分A)的小瓶中以制备250X Amplite Red原液。

2.乙酰胆碱标准溶液(50 mM):
将200μLddH2O加入到乙酰胆碱标准品(组分C)的小瓶中以制备50mM乙酰胆碱标准溶液。

 

2.标准溶液

乙酰胆碱标准
将20μL50mM乙酰胆碱标准溶液加入到980μL测定缓冲液(组分D)中以产生1000μM乙酰胆碱标准溶液。 取1000μM乙酰胆碱标准品,在分析缓冲液(组分D)中进行1:10,得到100μM乙酰胆碱标准品(AS7)。 取100μM乙酰胆碱标准品(AS7)和1:3连续稀释液,用分析缓冲液(组分D)连续稀释乙酰胆碱标准品(AS6-AS1)。 注意:稀释的乙酰胆碱标准溶液不稳定,应在4小时内使用。

 

3.工作溶液

1.将5mL测定缓冲液(组分D)加入乙酰胆碱探针(组分B)瓶中并充分混合。

2.将20μL250XAmplite Red 储备溶液加入乙酰胆碱探针溶液瓶中,制成乙酰胆碱(ACh)工作溶液。 注意:应立即使用乙酰胆碱(ACh)工作溶液并避光。 测定背景将随着更长的储存时间而增加。

点击查看样品制备方案

 

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中乙酰胆碱标准品和测试样品的布局。 AS =乙酰胆碱标准品(AS1-AS7,0.14至100μM); BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
AS1 AS1 ... ...
AS2 AS2 ... ...
AS3 AS3    
AS4 AS4    
AS5 AS5    
AS6 AS6    
AS7 AS7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
AS1-AS7 50ul 连续稀释液(0.14至100μM)
BL 50ul 分析缓冲液
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备乙酰胆碱标准品(AS),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。 注意:根据需要处理细胞或组织样本。

2.向乙酰胆碱标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL乙酰胆碱(ACh)工作溶液,使总乙酰胆碱测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μL乙酰胆碱(ACh)工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应10至30分钟,避光。

4.用Ex / Em = 540 / 590nm(截止值= 570nm)的荧光酶标仪监测荧光增加。

 

参考文献

Effect of Royal Jelly on Mouse Isolated Ileum and Gastrointestinal Motility
Authors: Shino Miyauchi-Wakuda, Satomi Kagota, Kana Maruyama-Fumoto, Hirokazu Wakuda, Shizuo Yamada, Kazumasa Shinozuka
Journal: Journal of Medicinal Food (2019)

Fermented rice peptides attenuate scopolamine-induced memory impairment in mice by regulating neurotrophic signaling pathways in the hippocampus
Authors: Henry M Corpuz, Hiroshi Fujii, Soichiro Nakamura, Shigeru Katayama
Journal: Brain Research (2019): 146322

Royal jelly increases peripheral circulation by inducing vasorelaxation through nitric oxide production under healthy conditions
Authors: Yaoyue Liang, Satomi Kagota, Kana Maruyama, Yuri Oonishi, Shino Miyauchi-Wakuda, Yoshihiko Ito, Shizuo Yamada, Kazumasa Shinozuka
Journal: Biomedicine & Pharmacotherapy (2018): 1210--1219

Hepatic vagus nerve regulates Kupffer cell activation via α7 nicotinic acetylcholine receptor in nonalcoholic steatohepatitis
Authors: Takahiro Nishio, Kojiro Taura, Keiko Iwaisako, Yukinori Koyama, Kazutaka Tanabe, Gen Yamamoto, Yukihiro Okuda, Yoshinobu Ikeno, Kenji Yoshino, Yosuke Kasai
Journal: Journal of Gastroenterology (2017): 1--12

Protective Effect of α-Lipoic Acid against α-Cypermethrin-Induced Changes in Rat Cerebellum
Authors: H Elsawy, MA Al-Omair, A Sedky, L Al-Otaibi
Journal: Journal of Chemical Neuroanatomy (2017)

Spirulina maxima Extract Ameliorates Learning and Memory Impairments via Inhibiting GSK-3β Phosphorylation Induced by Intracerebroventricular Injection of Amyloid-β 1--42 in Mice
Authors: Eun-Jeong Koh, Kui-Jin Kim, Ji-Hyeon Song, Jia Choi, Hyeon Yong Lee, Do-Hyung Kang, Ho Jin Heo, Boo-Yong Lee
Journal: International Journal of Molecular Sciences (2017): 2401

Anethole restores delayed gastric emptying and impaired gastric accommodation in rodents
Authors: Teita Asano, Shuji Aida, Shintaro Suemasu, Tohru Mizushima
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2016): 125--130

Dietary and donepezil modulation of mTOR signaling and neuroinflammation in the brain
Authors: Kalavathi Dasuri, Le Zhang, Sun OK Fernandez Kim, Annadora J Bruce-Keller, Jeffrey N Keller
Journal: Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular Basis of Disease (2016): 274--283

Dissolved organic matter or salts change the bioavailability processes and toxicity of the nanoscale tetravalent lead corrosion product PbO2 to medaka fish
Authors: Chun-Wei Chiang, Ding-Quan Ng, Yi-Pin Lin, Pei-Jen Chen
Journal: Environmental Science & Technology (2016): 11292--11301

Functionalised dihydroazo pyrimidine derivatives from Morita--Baylis--Hillman acetates: synthesis and studies against acetylcholinesterase as its inhibitors
Authors: Eeda Koti Reddy, C Remya, Ayyiliath M Sajith, KV Dileep, C Sadasivan, Shaik Anwar
Journal: RSC Advances (2016): 77431--77439

 

相关产品

产品名称 货号
Amplite NAD检测试剂盒 (荧光法)蓝色荧光 Cat#15280
Amplite NADP检测试剂盒(荧光法)蓝色荧光 Cat#15281
Amplite 荧光法乙酰胆碱酯酶检测试剂盒 红色荧光 Cat#11402


说明书
Amplite 荧光法乙酰胆碱检测试剂盒 红色荧光 .pdf