活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 蓝色荧光

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产品优势

灵敏度高

适用范围

用于活细胞内的过氧化氢检测

产品介绍

过氧化氢（H₂O₂）作为活性氧代谢的关键副产物，是调控多种氧化应激状态的重要分子。其参与的生物学过程与多种疾病密切相关，包括：哮喘、动脉粥样硬化、糖尿病血管病变、骨质疏松、多种神经退行性疾病以及唐氏综合征等。对该活性分子的检测有助于阐明氧化应激调控细胞内信号通路的分子机制。

Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒采用独特的OxiVision™ Blue过氧化氢探针，可实现活细胞内过氧化氢的精准定量。该细胞膜通透性探针与过氧化氢反应后产生蓝色荧光信号，其优化的检测体系特别适用于荧光显微镜观测，为活细胞过氧化氢水平监测提供了高灵敏度研究工具。

适用仪器

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中制备细胞

2.用OxiVision 蓝色过氧化物探针染色细胞

3.用测试化合物处理细胞

4.用DAPI滤光片或Ex / Em = 405 / 450nm监测荧光强度

储备溶液制备 

除非另有说明，所有未使用的储备液应分装为单次用量，-20°C保存，避免反复冻融

OxiVision 蓝色过氧化物储备液（500X）：

向组分A中加入40 µL DMSO（组分C），混匀

 注意：20 µL复溶后的储备液可满足1块板的检测需求。

           现配现用，避光保存。

工作溶液配制

取10 µL 500X储备液加入500 µL检测缓冲液（组分B）混匀

注意：工作液需现用现配

细胞样本制备指南：

详见https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html

标准实验方案（96孔板/384孔板）

1.96孔板：每孔加入90 µL细胞培养液+10 µL工作液；384孔板：每孔加入22.5 µL细胞培养液+2.5 µL工作液

注意：可直接在完全培养基中染色，无需洗涤

2.处理组：用含测试化合物的完全培养基或自选缓冲液，37°C孵育所需时间。对照组（未处理细胞）：加入等量化合物缓冲液。。

注：推荐使用完全培养基进行处理；若待测化合物对血清敏感，可先吸除含血清的培养基，随后加入1×Hanks平衡盐溶液与20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或自选缓冲液，亦可直接使用无血清培养基处理。

参考示例：我们采用100 μM过氧化氢在完全培养基中37℃处理Jurkat细胞90分钟以诱导过氧化氢产生（具体结果参见图1）。

3.使用DPBS缓冲液清洗细胞1-2次后，更换为检测缓冲液（组分C）——96孔板每孔加入100 μL，384孔板每孔加入25 μL。

4.使用带DAPI过滤器的荧光显微镜采集图像。

试剂应用文献