胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Ac-DEVD-pNA CAS 189950-66-1

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产品简介

Ac-DEVD-pNA是一种用于半胱天冬酶-3（caspase-3）的比色法底物。该蛋白酶在细胞暴露于凋亡条件时会迅速激活，并能够切割聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）。

重要提示

请务必储存在低于-15°C的温度下，并置于阴凉避光处。

自收到之日起12个月内使用。

样品实验方案

下述实验方案仅提供基本指导，需根据具体实验需求进行优化调整。

储备溶液配制

除非另有说明，所有未使用的储备溶液应分装成单次用量冻存管，配制后保存于-20℃环境，避免反复冻融。

Ac-DEVD-pNA储备溶液（100 mM）：

取 5 mg Ac-DEVD-pNA 粉末，加入 80 µL DMSO 溶液配制储备溶液。

工作液配制

Ac-DEVD-pNA 工作液（0.2 mM））：

取适量储备溶液，用所选检测缓冲液稀释至工作浓度。

注意：可选用50 mM Tris-HCl（pH 7.5）、0.3% NP-40、1.0 mM DTT等缓冲体系。

实验方案示例

1.取 0.01 mL 酶溶液（或细胞裂解液*）与 0.09 mL 检测工作液（由第二步制备）混合，使终体积为 0.1 mL。
注意：细胞裂解条件为50 mM Tris-HCl（pH 7.5）、0.3% NP-40、1.0 mM DTT，细胞密度为2×10⁶/mL。

2.于37°C孵育0-3小时，期间定期于405 nm波长处检测吸光度值。