胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 Z-LEHD-ProRed 620红

货号13435存储条件f/l
规格1 mg价格3720
Ex (nm)532Em (nm)619
分子量1865.70溶剂DMSO
产品详细介绍


简要概述

        胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 Z-LEHD-ProRed 620红是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,ProRed 蛋白酶底物无色,无荧光。ProRed 阻断蛋白酶裂解肽基被半胱氨酸蛋白酶产生强烈的红色荧光,可以在〜620 nm处的〜530 nm激发波长被监控到。 ProRed 衍生的胱天蛋白酶底物是最敏感的红色指示剂,用于荧光及各种蛋白酶活性检测。 LEHD-ProRed 酶底物主要用于检测蛋白酶9。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 Z-LEHD-ProRed 620红。

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产品说明书

样品实验方案

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定

1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。

1.2制备2X半胱天冬酶底物(50μM)测定溶液,如下所示:

50 L基质原液

100L DTT(1M)

400L EDTA(100 mM)

10mL Tris缓冲液(20mM),pH = 7.4

1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤1.2)混合,并在室温下孵育溶液至少1小时。

1.4使用荧光酶标仪检测荧光,或使用吸光度酶标仪检测吸光度。

 

2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针

2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。

2.2根据需要对细胞进行处理。

2.3通过用20mM Hepes缓冲液(HHBS)稀释Hanks中的DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X可渗透的半胱天冬酶底物(20μM)测定溶液。

2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤2.3)混合等体积的处理细胞,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育至少1小时。

2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。

2.6用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针(仅适用于#13470-13476)

3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。

3.2根据需要对细胞进行处理。

3.3将250 X DMSO储备溶液(来自步骤3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL细胞)添加到细胞溶液中,并将细胞在37°C,5%CO 2培养箱中孵育1 小时。

3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。

3.5用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

Degenerin channel activation causes caspase-mediated protein degradation and mitochondrial dysfunction in adult C. elegans muscle
Authors: Christopher J Gaffney, Freya Shephard, Jeff Chu, David L Baillie, Ann Rose, Dumitru Constantin-Teodosiu, Paul L Greenhaff, Nathaniel J Szewczyk
Journal: Journal of Cachexia, Sarcopenia and Muscle (2015)

 

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说明书
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 Z-LEHD-ProRed 620红.pdf