二氢乙锭（DHE,超氧化物阴离子荧光探针） CAS 38483-26-0
| Ex (nm) | 500 | Em (nm) | 582 |
| 分子量 | 315.41 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
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产品优势
能区分超氧化物与过氧化氢，其荧光发射波长约为600 nm。
适用范围
活性氧检测
产品介绍
二氢乙锭是一种高效活性氧检测探针。该染料可自由穿透细胞膜，经脱氢作用后转化为乙啶化合物，已广泛应用于NK细胞研究，并作为活体染料用于鉴定肿瘤中的增殖细胞和缺氧细胞。研究证实其适用于中性粒细胞、内皮细胞、HL60细胞及巨噬细胞等多种细胞类型。该探针主要优势在于能区分超氧化物与过氧化氢，其荧光发射波长约为600 nm。
适用仪器
| 荧光酶标仪 | |
| Ex: | 520nm |
| Em: | 600nm |
| Cutoff: | 550nm |
| 推荐孔板: | 纯黑色孔板 |
储备溶液配制
除非另有说明，所有未使用的储备溶液应分装为单次用量，配制后保存于-20°C，避免反复冻融。
二氢乙啶储备液配制：
配制5-10 mM DMSO储备液。
注：未使用的DMSO储备液需分装至单次使用管，-20°C避光保存。
工作液配制
二氢乙啶工作液：
使用生理缓冲液（如PBS、HBSS、HEPES）配制5–20 µM工作浓度。
注：合适的工作浓度需根据实际应用通过实验确定。
实验操作流程
1.向细胞中等体积加入工作液（例如生长培养基中的100 µL细胞悬液加入等体积染料工作液），室温或37°C孵育5至60分钟。
2.在施加实验诱导因素前，先检测负载染料细胞的基线荧光强度
阴性对照应应符合以下要求：
1.检测不含细胞的染料与缓冲液/培养基混合体系（含/不含诱导剂）的荧光值。在无细胞酯酶及其他氧化酶条件下，荧光随时间逐渐增强可能源于自发水解、空气氧化和/或光诱导氧化
2.检测未经处理的对照组细胞（在生长培养基或缓冲液中维持）的荧光值。健康细胞可通过胞内酶和/或天然抗氧化剂清除氧自由基，染料负载恢复期后应呈现低水平且相对稳定的荧光；但可能观察到因自发氧化导致的荧光渐强，或因染料逸出/光漂白导致的荧光减弱。无任何刺激条件下，健康未处理细胞出现荧光爆发可能预示细胞死亡或其他氧化事件
阳性对照可采用叔丁基过氧化氢（TBHP）刺激，终浓度约为100 µM（需根据细胞敏感性和反应性调整剂量）。
参考文献
