Cell Meter 细胞内NADH / NADPH荧光成像试剂盒 深红色荧光
货号15295存储条件F/L
规格100 Tests价格5940
Ex (nm)593Em (nm)655
分子量溶剂
产品详细介绍


简要概述

        Cell Meter 细胞内NADH / NADPH荧光成像试剂盒 深红色荧光 是美国AAT Bioquest生产的用于检测NADH/NADPH的试剂盒,细胞内二氢烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NADH及其磷酸酯NADPH的检测对于疾病诊断和药物发现是重要的。通常,氧化还原偶联NAD / NADH和NADP / NADPH在能量代谢,糖酵解,三羧酸循环和线粒体呼吸中起关键作用。细胞中NAD(P)H水平的增加与活性氧(ROS)和DNA损伤的异常产生有关。然而,由于缺乏敏感的NAD(P)H探针,在生物系统中检测细胞内NAD(P)H具有挑战性。 Cell Meter™细胞内NADH / NADPH荧光成像试剂盒提供了监测远光谱中活细胞中细胞内NAD(P)H水平的有效方法,并且可以与其他应用如GFP表达细胞或MitoTracker的应用相结合。 JJ1902 NAD(P)H是一种优秀的荧光探针,用于检测和成像细胞中的NADH / NADPH。该荧光探针结合NADH / NADPH,产生高灵敏度和特异性的强荧光信号。 JJ1902 NAD(P)H传感器可以很容易地加载到活细胞中,使用Cy5®过滤器可以方便地监测其荧光信号。该试剂盒针对荧光成像和酶标仪应用进行了优化。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 细胞内NADH / NADPH荧光成像试剂盒。 



产品说明书

实验样品示例

概述

1.在生长培养基中制备细胞

2.将细胞与测试化合物和JJ1902 NAD(P)H传感器工作溶液在37℃孵育20  -  30分钟

3.将细胞洗净并保持在测定缓冲液中

4.在Ex / Em = 590/655 nm(截止= 610 nm)或使用Cy5®过滤器的荧光显微镜下监测荧光强度(底部读取模式)

注意:在开始实验之前,在室温下解冻所有试剂盒组分。

 

操作方法

1.制备工作溶液

将10μL JJ1902 NAD(P)H探针储备溶液(组分A)加入2.5mL测定缓冲液(组分B)中,并充分混合。该JZL1707 NAD(P)H探针工作溶液在室温下1小时内稳定。

注意:40μL的JZL1707 NAD(P)H传感器原液足以用于一个板

 

2.实验步骤

①刺激NADP / NADPH,用10μL10X试验化合物(96孔板)或5μL5X试验化合物(384孔板)在无血清培养基或所需缓冲液(如PBS或HHBS)中处理细胞。 对于对照孔(未处理的细胞),加入相应量的培养基或化合物缓冲液。

注意:JJ1902 NAD(P)H探针在血清存在的情况下也是兼容的。探针的条件优化是强烈推荐的细胞系到细胞系。

②在细胞板中加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的JJ1902 NAD(P)H探针工作溶液。将细胞与测试化合物和JJ1902 NAD(P)H探针工作溶液在37℃共孵育20-30分钟,避光。

注意:对于NADH / NADPH阳性对照处理:将HeLa细胞与100μMNADH或NADPH在无血清培养基中孵育30分钟,并与JJ1902 NAD(P)H探针工作溶液在37℃下共培养30分钟。 详细信息请参见图1。

③用所需缓冲液洗涤细胞一次。移除每个孔中的溶液,并添加100μL/孔的测定缓冲液(组分B)用于96孔板或25μL/孔用于384孔板。

④使用底板读取模式在Ex / Em = 590 / 655nm(截止= 610 nm)下使用酶标仪监测荧光增加,或使用荧光显微镜和Cy5®过滤器过滤器获取图像。

 

参考文献

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产品名称 货号
Cell Meter 胞内NADH / NADPH荧光成像分析试剂盒 Cat#15290


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