活性氧 MitoROS 线粒体ROS 580

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产品优势  

1.特异性检测线粒体超氧化物：选择性靶向线粒体，在线粒体内被超氧化物（O₂⁻）氧化后产生红色荧光，对其他ROS/RNS（如H₂O₂、NO）敏感性较低。

2.高灵敏度和快速响应：可快速穿透活细胞膜并积聚于线粒体，氧化后荧光信号显著增强，适用于实时动态监测超氧化物水平。

3.兼容多种检测平台：适用于荧光显微镜（如共聚焦成像）和流式细胞术

适用范围

用于标记活细胞

产品介绍

活性氧（Reactive Oxygen Species, ROS）是含有氧的化学活性分子，例如超氧化物、羟自由基、单线态氧和过氧化物。由于外层电子未配对，ROS具有高度反应活性。它作为氧正常代谢的天然副产物生成，在细胞信号传导和稳态维持中起重要作用。然而在环境胁迫（如紫外线或高温）下，ROS水平会急剧升高，进而对细胞结构造成显著损伤，这种现象统称为氧化应激。

MitoROS™ 580是一种靶向线粒体的超氧化物敏感荧光染料，在活细胞中可特异性积聚于线粒体。该染料被超氧化物氧化后会发出红色荧光，可通过荧光显微镜或流式细胞仪监测线粒体内的超氧化物水平。MitoROS™ 580试剂能自由穿透活细胞膜并选择性定位在线粒体中，可被超氧化物快速氧化，且不易被其他活性氧（ROS）或活性氮（RNS）氧化，其氧化产物在细胞内具有强荧光特性。该试剂为研究多种病理过程中的氧化应激提供了重要工具。

储备液配制
除非另有说明，所有未使用的储备液均应分装成单次使用量，配制后于-20°C避光保存，避免反复冻融。

MitoROS™ 580储备液（1000X）

向MitoROS™ 580小瓶中加入13 µL二甲基亚砜（DMSO），充分混匀。

注：未使用的储备液需避光保存于-20°C。

工作液配制

将MitoROS™ 580的DMSO储备液用含20 mM Hepes缓冲液的Hanks平衡盐溶液（HHBS）稀释，配制成2X工作浓度。

注意：2X MitoROS™ 580工作液稳定性较差，需现配现用。

MitoROS 580操作指南

本操作指南仅供参考，需根据具体实验要求进行优化。

1.根据需要处理细胞

2.将细胞（如96孔板中每孔100 µL）与等体积的2X MitoROS™ 580工作液混合，于37°C避光孵育10-30分钟。

注意：1.细胞内MitoROS™ 580的终浓度不应超过1X，过高浓度可能导致细胞毒性效应，如线粒体形态改变及荧光向细胞核和胞质重新分布；

           2.不同细胞对MitoROS™ 580的反应存在差异，需相应调整工作浓度。

3.孵育完成后，用HHBS缓冲液轻柔洗涤细胞三次

4.使用荧光仪器（如荧光显微镜、流式细胞仪，激发/发射波长510/580 nm）进行分析检测。

试剂应用文献