Cell Meter 细胞内一氧化氮(NO)活性检测试剂盒 适合于流式细胞仪红色检测

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规格100 Tests价格4488
Ex (nm)586Em (nm)607
分子量溶剂
产品详细介绍


简要概述

Cell Meter 细胞内一氧化氮(NO)活性检测试剂盒 适合于酶标仪橙色检测 是美国AAT Bioquest生产的用于检测细胞内一氧化氮活性的试剂盒,一氧化氮(NO)是涉及许多生理和病理过程的重要生物调节剂。 改变的NO产生涉及各种免疫,心血管,神经变性和炎性疾病。 作为自由基,NO被快速氧化,并且体内存在相对低浓度的NO。 检测和了解NO在生物系统中的作用一直具有挑战性。 Cell Meter 荧光细胞内一氧化氮检测试剂盒提供了一种监测活细胞内细胞内NO水平的敏感工具。

Nitrixyte 探针在我们的试剂盒中开发和使用,作为DAF-2的优异替代品,用于检测和成像细胞中的游离NO。 与常用的DAF-2探针相比,Nitrixyte 探针具有更好的光稳定性和增强的细胞渗透性。 该特殊试剂盒使用Nitrixyte Orange,可与NO反应生成亮橙色荧光产品,其光谱特性与Cy3®和TRITC相似。Nitrixyte Orange可以很容易地加载到活细胞中,使用Cy3®或TRITC过滤器可以方便地监测其荧光信号。该试剂盒针对荧光成像和酶标仪应用进行了优化。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 细胞内一氧化氮(NO)活性检测试剂盒。 

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 640nm激光
发射: 660/20nm滤波片
通道: APC通道


产品说明书

样本实验方案

概述

1.准备细胞(0.5-1×106细胞/ mL)
2.添加1 µL 500X Nitrixyte 红色
3.将细胞与测试化合物和Nitrixyte Red在37ºC下孵育所需的时间
4.使用FL4通道的流式细胞仪分析细胞

 

溶液配制

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 NONOate阳性对照治疗储备液(50 mM):
将200 uL ddH2O加入小瓶NONOate阳性对照(组分B)中,制成50 mM NONOacte阳性对照处理原液。

 

2.工作溶液

用测定缓冲液(组分C)稀释50 mM NONOate阳性对照治疗原液,制成1-2 mM NONOate阳性对照工作溶液。

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样品操作及实验分析

1.对于每个样品,在0.5 mL温热培养基或您选择的缓冲液中以5×105至1×106细胞/ mL的密度制备细胞。注意:应单独评估每个细胞系,以确定诱导NO的最佳细胞密度。

2.向0.5 mL细胞悬液中加入1 µL 500X Nitrixyte Red(组分A)。注意:对于粘附细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在与Nitrixyte Red孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。

3.将细胞与测试化合物和Nitrixyte Red在37ºC下孵育所需的时间,以生成内源性或外源性NO。注意:适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和测试化合物。优化每个实验的孵育时间。注意:我们已在37℃的细胞培养基中使用Raw 264.7细胞与Nitrixyte Red工作溶液,20μg/ mL脂多糖(LPS)和1 mM L-精氨酸(L-Arg)孵育16小时。

4.降低已经用Ni​​trixyte Red预孵育30分钟的细胞。用1 mM DEA NONOate阳性对照工作溶液重悬细胞,并在37ºC下再孵育30分钟。有关详细信息,请参见图1。

5.使用流式细胞仪监测FL4通道(Ex / Em = 630/660 nm)处的荧光强度。

 

参考文献

MAGI1 Mediates eNOS Activation and NO Production in Endothelial Cells in Response to Fluid Shear Stress
Authors: Kedar Ghimire, Jelena Zaric, Begona Alday-Parejo, Jochen Seebach, Mélanie Bousquenaud, Jimmy Stalin, Grégory Bieler, Hans-Joachim Schnittler, Curzio Rüegg
Journal: Cells (2019): 388

Functions of transcription factors NF-$\kappa$B and Nrf2 in the inhibition of LPS-stimulated cytokine release by the resin monomer HEMA
Authors: Helmut Schweikl, Marialucia Gallorini, Gerd Pöschl, Vera Urmann, Christine Petzel, Carola Bolay, Karl-Anton Hiller, Amelia Cataldi, Wolfgang Buchalla
Journal: Dental Materials (2018)

Fluorescent real-time quantitative measurements of intracellular peroxynitrite generation and inhibition
Authors: Zhen Luo, Qin Zhao, Jixiang Liu, Jinfang Liao, Ruogu Peng, Yunting Xi, Zhenjun Diwu
Journal: Analytical biochemistry (2017): 44--48

Inducible Nitric Oxide Synthase (iNOS) Is a Novel Negative Regulator of Hematopoietic Stem/Progenitor Cell Trafficking
Authors: Mateusz Adamiak, Ahmed Abdelbaset-Ismail, Joseph B Moore, J Zhao, Ahmed Abdel-Latif, Marcin Wysoczynski, Mariusz Z Ratajczak
Journal: Stem Cell Reviews and Reports (2016): 1--12

 

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说明书
Cell Meter 细胞内一氧化氮(NO)活性检测试剂盒 适合于流式细胞仪红色检测 .pdf