Cyber Green 20X水溶液PCR定量
货号17591存储条件F/L
规格5x1 ml价格2340
Ex (nm)497Em (nm)520
分子量N/A溶剂Water
产品详细介绍


简要概述

        Cyber Green 染料是美国AAT Bioquest生产的一种绿色荧光核酸染料,具有使染料可用于多种应用的功能,包括qPCR,熔解曲线分析,嗜热解旋酶依赖性扩增(tHDA)的实时监测,常规溶液DNA定量和结晶染料的激发和发射光谱与荧光素(FAM)或SYBR®GreenI的激发和发射光谱非常接近,使染料与配备488 nm氩激光器或任何可见光激发波长的仪器兼容。 Green 染料在热和水解方面都非常稳定,在日常处理过程中提供了便利。染料本身基本上是非荧光的,但在与dsDNA结合后变得高度荧光.Cyber Green 染料的独特性质使其在定量实时PCR(qPCR)应用中特别有用。与广泛使用的SYBR Green I相比,Cyber Green 对PCR的抑制作用较小,不太可能引起非特异性扩增。因此,Cyber Green 可以比SYBR Green我高得多的染料浓度使用,从而产生更强大的PCR信号。更重要的是,定量PCR允许的较高的CYber Green 浓度消除了“染料再分布”问题,这可能在PCR后DNA融解曲线分析期间与SYBR Green一起发生。

        Cyber Green 20X水溶液专为qPCR使用而配制。可以使用现有的SYBR Green I或FAM光学设置在任何商业实时PCR循环仪上监测PCR反应。下面提供的qPCR协议用于使用常规非热启动Taq的PCR。使用热启动Taq可能需要在离子强度和pH方面对PCR缓冲液组成进行一些调整,以最好地利用Cyber Green 。例如,化学修饰的Taq,例如AmpliTaq Gold,可能更喜欢低低浓度的氯化钾或不含KCl的和较高的的Tris浓度(高达50mM的)。此外,经常加入水溶性溶剂如DMSO或甘油以稳定主混合物。可能需要根据所用的酶优化这些组分和pH值。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cyber Green 核酸凝胶染料。 

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产品说明书

染色方案

建议将以下方案用于非热启动Taq酶。

1.设置PCR反应如下:

5μL不含Mg+2的10倍的聚合酶缓冲液

2.5μL50mMMgCl2

每种5mM的2mM dNTP

2.5μL20XCyber Green

1-5单位的Taq DNA聚合酶

每种引物0.1-1μM(最终浓度)

双蒸水至终体积为50μL。

 

2.在热循环荧光计上进行实时PCR,并在退火或延伸步骤记录荧光信号。

注意:使用ABI序列检测系统时,请确保在WELL INSPECTOR选项卡下为被动参考选择NONE。

 

参考文献

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说明书
Cyber Green 20X水溶液PCR定量 .pdf