Helixyte Green 双链DNA荧光定量试剂盒 适合酶标仪检测

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产品优势

1.灵敏度高：等摩尔量的RNA存在下，也能特异性识别双链DNA。

2.操作便捷：即混即读，兼容96孔和384孔微孔板检测

 

适用范围

可用于选择性检测低至 25 pg/mL 的双链DNA

 

产品介绍

Helixyte™ Green 双链DNA定量检测试剂盒 可用于选择性检测低至 25 pg/mL 的双链DNA，且不受单链DNA、RNA及游离核苷酸的干扰。

该试剂盒的核心原理在于：Helixyte™ Green 染料与双链DNA结合后，会产生显著的荧光增强效应。 此检测方法在跨越三个数量级的浓度范围内均具有良好的线性关系，且几乎不受DNA序列差异的影响，使您能够精准测量多种来源的DNA，包括基因组DNA、病毒DNA、小量制备DNA以及PCR扩增产物。

与紫外吸光度法相比，本试剂盒的灵敏度高出数个数量级。即使在等摩尔量的RNA存在下，它也能特异性识别双链DNA。

该试剂盒操作稳健，采用 "即混即读" 的便捷形式，可兼容基于荧光的96孔和384孔微孔板检测系统。同时，它也适用于使用台式荧光计或手持式荧光计（例如，Qubit荧光计）进行检测。

样品实验方案

简要概述

加入100 µL dsDNA标准液或测试样品
加入100 µL Helixyte Green 工作溶液
在室温下孵育5-10分钟
监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光

 

溶液配制

1.标准溶液

dsDNA标准

将10 µL 100 µg / mL dsDNA储备溶液（组分C）添加到190 µL测定缓冲液（组分B）中，得到5 µg / mL dsDNA溶液，然后进行1：3连续稀释以获得dsDNA连续稀释标准液（DS7） -DS1）。

2.工作溶液

通过将50μLHelixyte Green （组分A）添加到10 mL的测定缓冲液（组分B）中，制备Helixyte Green 工作溶液。 通过用箔纸覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。 注意：我们建议在塑料容器中而不是玻璃中制备此溶液，因为染料可能会吸附到玻璃表面。 为了获得佳结果，该溶液应在准备后的几个小时内使用。

 

样品示例及操作

表1.固体黑色96孔微孔板中dsDNA标准品和测试样品的布局。 DS = dsDNA标准品（DS1-DS7，2.3至1667 ng / mL）; BL =空白控制； TS =测试样品。

BL	BL	TS	TS
DS1	DS1	...	...
DS2	DS2	...	...
DS3	DS3
DS4	DS4
DS5	DS5
DS6	DS6
DS7	DS7

表2.每个孔的试剂组成

孔	容积	试剂
DS1-DS7	100ul	系列稀释液（2.3至1667 ng / mL）
BL	100ul	TE
TS	100ul	测试样品

1.根据表1和2中提供的布局，准备dsDNA标准品（DS），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂代替100 µL。

2.将100 µL Helixyte Green 工作溶液添加到dsDNA标准品，空白对照和测试样品的每个孔中，使dsDNA测定总体积为200 µL /孔。 对于384孔板，将25 µL的BLANK分析混合物加到每个孔中，总体积为50 µL /孔。

3.在避光条件下，于室温下孵育反应5至10分钟。

4.使用荧光酶标仪在Ex / Em = 490/525 nm（cut off:515 nm）处检测荧光的增加。

 

参考文献

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产品名称	货号
Helixyte Green 双链DNA荧光定量试剂盒	Cat#17651