StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒 高选择性

货号17657存储条件f/l
规格100 Tests价格4356
Ex (nm)Em (nm)
分子量溶剂
产品详细介绍


简要概述

        StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的RNA检测试剂盒,检测和定量少量RNA对于各种分子生物学程序非常重要,例如测量体外转录RNA的产量和测量RNA浓度,然后进行Northern印迹分析,S1核酸酶测定,RNase保护测定,cDNA文库制备,反向转录PCR和差异显示PCR。最常用的测量核酸浓度的技术是测定260nm处的吸光度。基于吸光度的方法的主要缺点是由蛋白质,游离核苷酸和其他UV吸收化合物引起的干扰。使用敏感的荧光核酸染色可以缓解这种干扰问题。 StrandBrite RNA定量试剂是一种超灵敏荧光核酸染色剂,用于定量溶液中的RNA。 StrandBrite RNA定量试剂可使用荧光酶标仪或荧光分光光度计检测低至1.4 ng / mL的RNA。我们的StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒包括我们的StrandBrite 绿色核酸染色,具有优化且稳健的方案。它提供了一种方便的方法来量化溶液中的RNA。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒 。 



产品说明书

96孔板检测示例

操作步骤

以下方案是使用StrandBrite Green定量RNA的示例。 打开前让所有组件升温至室温。处理所有材料时,务必使用干净的一次性手套 使用无核酸酶水和无菌一次性聚丙烯塑料制品进行试剂制备。

注意:没有数据可用于解决StrandBrite Green RNA染色的致突变性或毒性。 因为这种试剂与核酸结合,所以应将其作为潜在的诱变剂进行处理,并进行适当的处理。 应谨慎处理DMSO储备溶液,因为已知DMSO有助于有机分子进入组织。

 

1.准备1X测定缓冲液

通过用无菌,蒸馏,无核酸酶的水稀释浓缩的缓冲液20X(组分B)来制备1X测定缓冲液。

 

2.准备StrandBrite 绿色工作溶液

通过在1X测定缓冲液中将浓缩的DMSO溶液稀释200倍来制备StrandBrite Green工作溶液。例如,将50μLStrandBrite Green(组分A)加入10 mL 1X测定缓冲液中(来自步骤1)。通过用铝箔覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。

注1:我们建议将此溶液用塑料容器而不是玻璃制备,因为染料可能会吸附到玻璃表面。

注2:为获得最佳结果,该溶液应在制备后几小时内使用。

 

3.准备RNA标准品的连续稀释液(0至1μg/ mL):

3.1将10μL100μg/ mL RNA原液(组分C)加入990μL分析缓冲液(组分B)中,得到1μg/ mL RNA溶液,然后进行1:3连续稀释,得到约1000,300, 100,30,10,3,1和0 ng / mL。

注意:未使用的核糖体RNA标准品(组分C)应在无核酸酶的塑料瓶中分成单次使用的等分试样,并储存在-20℃。

3.2如说明书中表1和2中所述,将RNA标准品和含有测试样品的RNA添加到96孔固体黑色微孔板中。

 

4.运行RNA测定:

4.1将100μLStrandBrite 绿色工作溶液(来自步骤2)添加到RNA标准品,空白对照和测试样品的每个孔中(参见步骤3)中,使总RNA测定体积为200μL/孔。

注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μLStrandBrite 绿色工作溶液。

4.2在室温下孵育反应2至5分钟,避光。

4.3使用荧光分光光度计在Ex / Em = 490 / 545nm(515nm处的截止值)下观察荧光增加。

注意:为尽量减少光漂白,请保持所有样品的荧光测量时间不变。

4.4空白孔中的荧光(仅含测定缓冲液)用作对照,并从具有RNA标准品或测试样品的那些比色皿的值中减去。根据RNA标准曲线确定样品的RNA浓度。

 

参考文献

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产品名称 货号
StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒 高选择性 Cat#17657
StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒 Cat#17656


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