英文flag致电:029-68064558
搜索

ReadiLink™xtra Rapid AF488抗体标记试剂盒(标记50ug抗体)*兼容BSA*

英文名称:ReadiLink™ xtra Rapid XFD488 Antibody Labeling Kit *BSA-Compatible, XFD488 Same Structure to Alexa Fluor™ 488*
价格 2753
产品规格
2 Labelings

产品货号
产品参数
Ex (nm)499Em (nm)520
分子量N/A溶剂-
存储条件-
产品概述

产品货期

咨询

 

产品优势  

1.可完成2×50 μg抗体的高效标记

2.兼容单克隆及多克隆抗体的快速标记

3.采用两步混合标记技术,无需离心柱纯化步骤即可完成抗体标记

 

适用范围

主要用于标记抗体 

 

产品介绍

XFD488由AAT Bioquest 生产,其化学结构与 Alexa Fluor® 488完全相同(Alexa Fluor® 是 ThermoFisher 的注册商标)。ReadiLink™ xtra快速抗体标记试剂盒仅需2步简单混合操作,无需柱纯化。该试剂盒采用特殊配方和预活化的XFD488,具有优异的稳定性,并能与抗体高效、高选择性结合。

本试剂盒包含标记约2×50 μg抗体所需的所有关键组分,其中提供的两管预活化XFD488染料,每管均可标记约50 μg抗体。ReadiLink™ xtra XFD488快速抗体标记试剂盒为单克隆和多克隆抗体标记绿色荧光XFD488染料提供了一种便捷可靠的方法。XFD488是目前最常用的抗体标记荧光染料之一。适用于流式细胞术、免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、蛋白质印迹(WB)、 酶联免疫吸附测定ELISA)等应用。

实验方案

实验前重要提示:

请将所有组分恢复至室温后短暂离心,开盖前确保管壁附着物完全沉降;所有工作液需现用现配,配制完成后请立即开始偶联反应。本操作方案为推荐流程,实际实验条件可根据具体研究需求进行优化调整

 

标准操作规程(标记50μg蛋白质)

将所有组分加热并在打开前将样品瓶短暂离心,并在开始结合前准备所需的溶液。

1.准备蛋白质溶液(溶液A):

1.1 标记50µg蛋白质(假设目标蛋白质浓度为1mg / mL), 取50 µL目标蛋白溶液,加入5 µL反应缓冲液(组分B,占总体积10%)

注:如果您的蛋白质浓度不同,请相应调整蛋白质体积,使~50μg蛋白质可用于标记反应。

 

1.2 标记100µg蛋白质(假设目标蛋白质浓度为1mg / mL),取100 µL目标蛋白溶液,加入10 µL反应缓冲液(组分B,占总体积10%)

 注:推荐使用pH 7.2-7.4的1X PBS缓冲液;

若蛋白溶解于甘氨酸缓冲液,需先透析至PBS或使用Millipore UFC501008超滤管(10 kDa截留分子量)去除游离氨基/铵盐(如硫酸铵、乙酸铵等)

 注:含有0.1%至0.5%牛血清白蛋白(BSA)作为稳定剂的不纯抗体或抗体仍可获得良好的标记效果。

 注:建议最终蛋白质浓度范围为1-2 mg / mL; 当浓度<1 mg/mL时偶联效率将显著下降。

 

2.偶联反应:

2.1 将蛋白质溶液(溶液A)加入到一瓶标记染料(组分A)中,通过反复移液几次将其混合均匀,或将小瓶涡旋几秒钟。

注: 若标记100 µg蛋白,需将蛋白样本均分为两份(各50 µg),分别与两管标记染料反应后合并。

2.2 将缀合反应混合物在室温下保持30-60分钟。

注:如果需要,可以旋转或摇动缀合反应混合物更长的时间。

 

3.终止偶联反应:

3.1   50 µg蛋白标记,加入5 µL TQ染料淬灭缓冲液(组分C);

       100 µg蛋白标记,加入10 µL TQ染料淬灭缓冲液(组分C);

        加入的缓冲液是总反应体积的10%。

3.2   混匀后室温静置10分钟,标记蛋白即可使用

 

4.蛋白偶联物的储存条件

蛋白质缀合物应在载体蛋白(例如0.1%牛血清白蛋白)存在下以> 0.5 mg / mL的浓度存储。为了更长的存储时间,可以将蛋白质结合物冻干或分成单份使用,并存储在≤–20°C下。