钙离子指示剂EGTA, AM
货号21005存储条件F/L
规格10 mg价格1740
Ex (nm)Em (nm)
分子量668.6溶剂DMSO
产品详细介绍


简要概述

关键参数

分子量:668.6

溶剂:DMSO

消光系数:N/A

Kd: nM

 

产品介绍

        钙离子指示剂EGTA, AM是美国AAT Bioquest生产的钙离子指示剂,EGTA是最为被广泛使用的钙离子选择性的螯合剂。它与钙离子形成的复合物比与镁离子形成的复合物要稳定100,000倍。它被用来制备钙缓冲液和控制钙离子的浓度。EGTA, AM是EGTA的乙酰甲酯衍生物,通过AM法,能被轻易负载到细胞中。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的钙离子指示剂EGTA, AM。 

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产品说明书

操作步骤

1.准备HHBS缓冲液,10%Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。

2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM EGTA AM * CAS 99590-86-0 *储备液。
2.1EGTA AM * CAS 99590-86-0 *使用量:1 mg
2.2所需浓度:2 mM
2.3在合适的容器中,将1mg EGTA AM * CAS 99590-86-0 *与747.83μL无水DMSO混合。
 

3.使用10μMEGTAAM * CAS 99590-86-0 * 4在HHBS中制备2X工作溶液,0.08%Pluronic®F-127和2 mM丙磺舒。
3.1EGTA AM * CAS 99590-86-0 *的最终孔内浓度:5μM
3.2Pluronic®F-127的最终井内浓度:0.04%
3.3最终孔内浓度的丙磺舒:1mM
3.4在合适的容器中混合16μLEGTAAM * CAS 99590-86-0 *,25.6μL10%Pluronic®F-127和256μL25mM丙磺舒。接下来,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为3.2 mL。
注意:对于大多数细胞系,我们建议EGTA AM * CAS 99590-86-0 *的最终浓度为4至5μM。
注意:推荐的Pluronic F-127井浓度最终为0.02%至0.04%。
注意:推荐的最终浓度为1至2.5 mM的Probenecid。
 

4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X,并将每种组分的最终浓度调节至以下:5μMEGTAAM * CAS 99590-86-0 *,0.04%Pluronic?F-127,1mM丙磺舒。
 

5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-120分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
 

6.用1.0 mM Probenecid准备HHBS缓冲液(或您选择的缓冲液)。
6.1在合适的容器中加入160μL的25mM丙磺舒。接下来,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为4 mL。
 

7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液,使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先,从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS(或您选择的缓冲液)。
 

8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = / nm运行实验。

 

参考文献

Distortion of the Actin A-Triad Results in Contractile Disinhibition and Cardiomyopathy
Authors: Meera C Viswanathan, William Schmidt, Michael J Rynkiewicz, Karuna Agarwal, Jian Gao, Joseph Katz, William Lehman, Anthony Cammarato
Journal: Cell Reports (2017): 2612--2625

Routes of Ca2+ Shuttling during Ca2+ Oscillations FOCUS ON THE ROLE OF MITOCHONDRIAL Ca2+ HANDLING AND CYTOSOLIC Ca2+ BUFFERS
Authors: László Pecze, Walter Blum, Beat Schwaller
Journal: Journal of Biological Chemistry (2015): 28214--28230

 

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产品名称 货号
钙离子指示剂EGTA, AM *10mM DMSO溶液* Cat#21006


说明书
钙离子指示剂EGTA, AM.pdf