钙离子荧光探针Indo-1, AM
货号21036存储条件F/L
规格20x50 ug价格2100
Ex (nm)346Em (nm)475
分子量1009.91溶剂DMSO
产品详细介绍


简要概述

        钙离子荧光探针Indo-1, AM是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针,在许多生物学研究中钙离子的测定非常重要。在与钙离子结合的条件下,荧光探针显现出光谱响应,这使研究者可以通过利用荧光显微镜、流式细胞仪、荧光分光镜和荧光分光仪等来研究细胞内部游离的Ca2+浓度的变化。在众多易受UV(紫外光)激发的钙离子指示剂中,Fura-2和Indo-1是最常使用的。当Indo-1 按比率发射时,Fura-2能按比例激发。Fura-2在按比例成像显微检测法中使用,在这里改变激发波长与改变发射光波长更有实用性。在与Ca2+结合的条件下,通过扫描300~400nm 的激发光谱发现Fura-2光吸收发生改变,当时监测到发射光在510 nm处。相对地,Indo-1在流式细胞术中作为染料使用,在这里用单一的激光器激发更有实际意义(通常使用光谱线位移在351?64 nm的氩离子激光器)。Indo-1的发射光从无游离Ca2+环境下的480nm转移到400 nm处(当与Ca2+)。Indo-1 AM是Indo-1的一种具有细胞渗透性的形式。百萤生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供最优质的钙离子荧光探针。

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产品说明书

操作说明

1.准备HHBS缓冲液,10%Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。

2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM Indo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 *储备液。
2.1Indo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 *使用量:1 mg
2.2所需浓度:2 mM
2.3在合适的容器中,将1mg Indo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 *与495.09μL无水DMSO混合。
 

3.使用10μMIndo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 * 4在HHBS中制备2X工作溶液,0.08%Pluronic®F-127和2mM Probenecid。
3.1最终孔内浓度为Indo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 *:5μM
3.2Pluronic®F-127的最终井内浓度:0.04%
3.3最终孔内浓度的丙磺舒:1mM
3.4在合适的容器中混合16μLIndo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 *,25.6μL10%Pluronic®F-127,和256μL25mM丙磺舒。接下来,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为3.2 mL。
注意:对于大多数细胞系,我们建议最终浓度为Indo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 *为4至5μM。
注意:推荐的Pluronic F-127井浓度最终为0.02%至0.04%。
注意:推荐的最终浓度为1至2.5 mM的Probenecid。
 

4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X,并将每种组分的最终浓度调节至以下:5μMIndo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 *,0.04%Pluronic®F-127,1mM丙磺舒。
 

5.孵育染料

5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-120分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
 

6.用1.0 mM Probenecid准备HHBS缓冲液(或您选择的缓冲液)
6.1在合适的容器中加入160μL的25mM丙磺舒。接下来,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为4 mL。
 

7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液,使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先,从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS(或您选择的缓冲液)。
 

8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 346/475 nm运行实验。

 

参考文献

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Nifedipine stimulates proliferation and migration of different breast cancer cells by distinct pathways
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Inhibition of pyruvate kinase M2 by reactive oxygen species contributes to the development of pulmonary arterial hypertension
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Authors: IAIN JOHNSON
Journal: Unknown

 

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产品名称 货号
钙离子荧光探针Indo-1, AM Cat#21030


说明书
钙离子荧光探针Indo-1, AM.pdf