钙离子荧光探针Fura-8, AM

货号21056存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格10x50 ug价格984
Ex (nm)354Em (nm)525
分子量951.90溶剂DMSO
产品详细介绍


简要概述

钙离子荧光探针Fura-8, AM是美国AAT Bioquest生产的用于标记钙离子的荧光探针,虽然Fura-2已被广泛用作优选的激发比率钙指示剂,但它具有某些局限性,例如与单波长钙染料如Fluo-8®和Cal-520®相比灵敏度较低。AAT最近开发了Fura-8 以进一步改善Fura-2的钙响应。Fura-8的发射转换为更长的可见波长,与普通滤波器组兼容。它具有相当的钙亲和力(对Fura-2)。Fura-8 AM比Fura-2 AM对钙更敏感,信号/背景比高于Fura-2 AM。我们建议使用Ex / Em = 354 / 530nm和415 / 530nm进行比率测量,即通过监测530nm处的发射强度来计算354nm和415nm处的激发强度比。百萤生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供最优质的钙离子荧光探针。

点击查看实验方案

钙离子篇:时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: Fura 2滤波片
发射: Fura 2滤波片
推荐孔板: 黑色透明
荧光酶标仪  
激发: 355,415nm
发射: 530nm
cutoff: 475nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 底读模式


产品说明书

操作说明

1.准备HHBS缓冲液,10%Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。
 

2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM Fura-8 ,AM原液。
2.1使用量的Fura-8 ,AM:1 mg
2.2所需浓度:2 mM
2.3在合适的容器中,将1mg Fura-8 TM,AM与525.27μL无水DMSO混合。

3.使用10μMFura-8 ,AM 4在HHBS中制备2X工作溶液,0.08%Pluronic®F-127和2 mM丙磺舒。
3.1最终孔内浓度为Fura-8 ,AM:5μM
3.2Pluronic®F-127的最终井内浓度:0.04%
3.3最终孔内浓度的丙磺舒:1mM
3.4在合适的容器中混合16μLFura-8 ,AM,25.6μL10%Pluronic F-127和256μL25mM丙磺舒。下一个,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为3.2 mL。
注意:对于大多数细胞系,我们建议使用Fura-8™的最终浓度,AM为4至5μM。
注意:推荐的Pluronic F-127井浓度最终为0.02%至0.04%。
注意:推荐的最终浓度为1至2.5 mM的Probenecid。
 

4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X,并将每种组分的最终浓度调节至以下:5μMFura-8 TM,AM,0.04%Pluronic®F-127,1mM丙磺舒。
 

5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-120分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
 

6.用1.0 mM Probenecid准备HHBS缓冲液(或您选择的缓冲液)。
6.1在合适的容器中加入160μL的25mM丙磺舒。接下来,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为4 mL

7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液,使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先,从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS(或您选择的缓冲液)。
 

8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 354/525 nm运行实验。

 

参考文献

Nifedipine stimulates proliferation and migration of different breast cancer cells by distinct pathways
Authors: Tao Zhao, Dongqing Guo, Yuchun Gu, Yang Ling
Journal: Molecular Medicine Reports (2017): 2259--2263

Inhibition of pyruvate kinase M2 by reactive oxygen species contributes to the development of pulmonary arterial hypertension
Authors: Dongqing Guo, Junzhong Gu, Hui Jiang, Asif Ahmed, Zhiren Zhang, Yuchun Gu
Journal: Journal of molecular and cellular cardiology (2016): 179--187

Nifedipine promotes the proliferation and migration of breast cancer cells
Authors: Dong-Qing Guo, Hao Zhang, Sheng-Jiang Tan, Yu-Chun Gu
Journal: PloS one (2014): e113649

Bioanalytics/Illumination: Just-right light-Inherently adaptive for application-specific needs
Authors: IAIN JOHNSON
Journal: Unknown



说明书
钙离子荧光探针Fura-8, AM.pdf