pH荧光探针BCECF, AM

货号21202存储条件f/l
规格1 mg价格1836
Ex (nm)504Em (nm)527
分子量808.69溶剂DMSO
产品详细介绍


简要概述

        pH荧光探针BCECF, AM是美国AAT Bioquest生产的用于检测pH的荧光探针,细胞内pH在许多细胞事件中起重要的调节作用,包括细胞生长,钙调节,酶活性,受体介导的信号转导,离子转运,胞吞作用,趋化性,细胞粘附和其他细胞过程。近年来,pH敏感性荧光染料已被广泛应用于监测细胞内pH的变化。使用荧光pH指示剂的成像技术还允许研究人员使用其他技术(如微电极)实现更大的空间分辨率和采样密度来研究这些过程。其中,2',7'-双 - (2-羧乙基)-5-(和-6) - 羧基荧光素(BCECF)是最常用的pH探针,因为它可用于比率监测细胞pH。BCECF AM是BCECF的细胞渗透型。百萤生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供最优质的pH荧光探针BCECF, AM。

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产品说明书

操作步骤

1.准备HHBS缓冲液和10%Pluronic®F-127溶液。

 

2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至20 mM BCECF,AM原液。
2.1使用的BCECF,AM的量:1毫克
2.2所需浓度:2 mM
2.3在合适的容器中,将1mg BCECF,AM与618.28μL无水DMSO混合。
 

3.使用10μMBCECF,AM 3在HHBS中制备2X工作溶液和0.08%Pluronic®F-127。
3.1最终孔内浓度为BCECF,AM:5μM
3.2Pluronic®F-127的最终井内浓度:0.04%
3.3在合适的容器中混合16μLBCECF,AM和25.6μL10%Pluronic F-127。然后,添加HHBS或您的缓冲区
选择直到体积为3.2 mL。
注意:对于大多数细胞系,我们建议最终浓度为BCECF,AM为4至5μM。
注意:推荐的Pluronic F-127井浓度最终为0.02%至0.04%。
 

4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X,并将每种组分的最终浓度调节至以下:5μMBCECF,AM,0.04%Pluronic®F-127
 

5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育30-60分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
 

6.准备HHBS缓冲液(或您选择的缓冲液)。
6.1在合适的容器中加入HHBS或您选择的缓冲液,直至体积为4 mL。
 

7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液,使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先,从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS(或您选择的缓冲液)。
 

8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 503/528 nm运行实验。

 

参考文献

The F0F1 ATP synthase regulates human neutrophil migration through cytoplasmic proton extrusion coupled with ATP generation
Authors: Jun Gao, Tian Zhang, Zhanfang Kang, Weijen Ting, Lingqing Xu, Dazhong Yin
Journal: Molecular Immunology (2017): 219--226

Oxidative Stress-Activated NHE1 Is Involved in High Glucose-Induced Apoptosis in Renal Tubular Epithelial Cells
Authors: Yiqing Wu, Min Zhang, Rui Liu, Chunjie Zhao
Journal: Yonsei Medical Journal (2016): 1252--1259

 

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产品名称 货号
pH荧光探针BCECF, AM*超级纯* Cat#21203


说明书
pH荧光探针BCECF, AM.pdf