PhosphoWorks 发光测定ATP测定试剂盒*稳定发光*

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产品优势

1.灵敏度高

2.发光信号稳定时间长达 4 小时

适用范围

用于ATP检测

产品介绍

三磷酸腺苷（ATP）在细胞能量学、代谢调控及细胞信号传导中发挥着核心作用。PhosphoWorks™ ATP检测试剂盒提供了一种快速、简便且均质的发光检测方法，用于测定哺乳动物细胞的增殖与细胞毒性。该检测可采用便捷的96孔和384孔微孔板形式进行，其高灵敏度特性支持对多种生物系统、环境样本及食品中ATP的检测。

PhosphoWorks ATP 检测试剂盒的发光信号稳定时间长达 4 小时，无需混合或分离操作即可保持稳定发光，能最大限度减少操作时间。

操作步骤

简要概述

1.制备含测试化合物的细胞（样品）（96 孔板每孔 100 µL，384 孔板每孔 25 µL）

2.加入等体积的 ATP 工作液（96 孔板每孔 100 µL，384 孔板每孔 25 µL）

3.在室温下孵育10-20分钟

4.监测发光强度

重要注意事项

为获得好的结果，建议使用白色培养板。实验开始前，将试剂盒所有组分在室温下解冻

工作溶液制备

1.将整瓶10 mL反应缓冲液（组分C）转移到ATP（组分B）中并充分混合。

2.向组分 B+C 混合液中加入 20 µL ATP 监测酶（组分 A），充分混合，制成 ATP 工作液。

注意：避免外源性生物物质可能造成的ATP污染

细胞样本制备指南请参阅：
https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html

样品试验方案

1，ATP检测步骤：

1.处理细胞样本时，96孔板每孔加入10 µL 10X浓度化合物工作液，384孔板每孔加入5 µL 5X浓度化合物工作液（使用所需化合物缓冲液配制）。空白孔（仅培养基无细胞）加入对应体积的化合物缓冲液

2.将细胞培养板置于37°C、5% CO2培养箱中孵育所需时间（如24、48或96小时）

3.向每孔中加入100μL（96孔板）或25μL（384孔板）的ATP工作溶液。

4.在室温下孵育10-20分钟。

5.用标准发光计监测发光强度。

2.生成标准ATP校准曲线：

        如果需要计算样本中ATP绝对含量，需同步制作ATP标准曲线

1.用含 0.1% BSA 的 PBS 缓冲液制备一系列浓度的 ATP 稀释液，同时设置不含 ATP 的样品（作为对照）以测定背景发光。

注意：ATP浓度范围建议为1 nM至10 µM

2.取等量ATP标准品溶液加入空白微孔板（96孔板每孔100 µL，384孔板每孔25 µL）

3.每孔加入100 µL（96孔板）或25 µL（384孔板）ATP工作液

4.将反应混合物在室温下孵育10至20分钟。

5.用标准光度计监测发光强度。

6.生成ATP标准曲线。

试剂应用文献