PhosphoWorks 发光测定ATP测定试剂盒* Bright Glow *

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产品优势

1.灵敏度高，最低可检测到每孔 10 个细胞

2.无需混合或分离操作即可保持稳定发光，减少操作时间

适用范围

用于ATP检测

产品介绍

三磷酸腺苷（ATP）在细胞能量学、代谢调控及细胞信号传导中发挥着核心作用。PhosphoWorks™ ATP检测试剂盒提供了一种快速、简便且均质的发光检测方法，用于测定哺乳动物细胞的增殖与细胞毒性。该检测可采用便捷的96孔和384孔微孔板形式进行，其高灵敏度特性支持对多种生物系统、环境样本及食品中ATP的检测。

PhosphoWorks ATP 检测试剂盒最低可检测到每孔 10 个细胞，无需混合或分离操作即可保持稳定发光，能最大限度减少操作时间。

样品实验方案

简要概述

1.制备含测试化合物的细胞样本（96孔板每孔100 µL，384孔板每孔25 µL）

2.加入等体积ATP工作液（96孔板每孔100 µL，384孔板每孔25 µL）

3.室温孵育10-20分钟

4.监控发光强度

重要注意事项
为获得好的实验结果，建议使用白色微孔板。所有试剂组分需在实验前于室温完全解冻。

溶液配制

工作溶液配制

1.将反应缓冲液（组分C，10 mL）转移到ATP探针（组分B）中，并充分混合。

2.取20 µL ATP监测酶（组分A）加入B+C混合液中，混匀制成ATP工作液。

注意：避免外源性生物物质可能造成的ATP污染

细胞样本制备指南请参阅：
https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html

样品操作

ATP检测步骤

1.处理细胞样本时，96孔板每孔加入10 µL 10X浓度化合物工作液，384孔板每孔加入5 µL 5X浓度化合物工作液（使用所需化合物缓冲液配制）。空白孔（仅培养基无细胞）加入对应体积的化合物缓冲液

2.将细胞培养板置于37°C、5% CO₂培养箱中孵育所需时间（如24、48或96小时）

3.每孔加入100 µL（96孔板）或25 µL（384孔板）ATP工作液

4.室温孵育10-20分钟

5.使用标准化学发光检测仪记录发光强度

生成标准ATP校准曲线：

如果需要计算样品中ATP的绝对量，则需同步制作ATP标准曲线

1.通过包含不含ATP的样品（作为对照）来测量背景发光，在含0.1％BSA的PBS缓冲液中稀释一系列ATP。

注意：通常，ATP浓度从1 nM到10 µM是合适的。

2.取等量ATP标准品溶液加入空白微孔板（96孔板每孔100 µL，384孔板每孔25 µL）

3.每孔加入100 µL（96孔板）或25 µL（384孔板）ATP工作液

4.将反应混合物在室温下孵育10至20分钟。

5.使用标准发光计监控发光强度。

6.绘制ATP标准曲线。

试剂应用文献