钙黄绿素蓝，AM
| Ex (nm) | 359 | Em (nm) | 458 |
| 分子量 | 788.65 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品货期
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产品优势
细胞渗透性好：可自由穿透活细胞膜，经水解后生成强荧光
适用范围
用于检测细胞活力
产品介绍
Calcein UltraBlue™ AM 是 Calcein UltraBlue™ 的一种细胞膜渗透性版本。进入活细胞后，弱荧光的 Calcein UltraBlue™ AM 会被水解为 Calcein UltraBlue™，其激发/发射光谱特性与 Calcein Blue、DAPI、Hoechst 和 AMCA 相似。这种与典型绿色和红色荧光染料（如 FITC、TMR 和 Texas Red）显著不同的光谱特性，为多重实验检测提供了更多选择。
Calcein UltraBlue™ 的光谱特性与 Calcein Blue 类似，但在生理 pH 条件下，它具有更高的光稳定性和更强的荧光强度，因此比 Calcein Blue 更稳定、更灵敏，是一种更优的荧光探针。
选择指南
| Dye | Calcein Blue | CytoCalcein™ Violet 450 | Calcein UltraBlue™ | CytoCalcein™ Violet 500 | Calcein UltraGreen™ | Calcein | Calcein Orange™ | Calcein Red™ | Calcein Deep Red™ | |
| 原理 | 在活细胞中，非荧光钙黄绿素 AM 在细胞内酯酶的作用下 AM 酯水解后转化为荧光钙黄绿素产物。 | |||||||||
| 荧光效果 | 活细胞具有高度荧光，很容易与无荧光的死细胞区分开。 | |||||||||
| Laser(nm) | UV (350) | Violet (405) | UV (350) | Violet (405) | Blue (488) | Blue (488) | Green (532) | Yellow (561-568) | Red (633-647) | |
| Ex/Em(nm) | 354/441 | 406/445 | 359/458 | 420/505 | 492/514 | 501/521 | 531/545 | 562/576 | 643/663 | |
| 是否复用 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | |
| 染料相容性 | 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | |
| 样品类型 | 活细胞 | |||||||||
| 适用仪器 | 荧光显微镜、荧光酶标仪、流式细胞仪 | |||||||||
| 货号 | 22007 | 22012 | 21908 | 22013 | 21905 | 22003 | 22009 | 21900 | 22011 | |
操作步骤
储备溶液配制
所有未使用的储备溶液均应分装成单次使用量，并于-20°C保存（除非另有说明）。避免反复冻融。
Calcein Ultrablue™AM储备液
使用优质无水DMSO配制2-5 mM的Calcein Ultrablue™AM储备液。
注：可采用非离子型表面活性剂Pluronic® F-127提高AM酯的水溶性，染色缓冲液中Pluronic® F-127终浓度建议为0.02%（百萤生物提供多种Pluronic® F-127产品）。AM酯类试剂应避免与Pluronic® F-127长期共存。
工作液配制
Calcein Ultrablue™AM工作液
选择合适缓冲液（如Hanks或Hepes缓冲液）配制1-10 µM工作液。多数细胞系推荐使用4-5 µM终浓度，具体浓度需通过实验优化。
注：若细胞存在有机阴离子转运体，可加入1-2.5 mM丙磺舒或0.1-0.25 mM苯磺唑酮以减少水解产物的外排。
实验操作流程
1.移除培养基，用无血清缓冲液洗涤细胞一次
2.加入Calcein Ultrablue™AM工作液，37°C孵育30-60分钟
3.更换为HHBS或含阴离子转运抑制剂（如1 mM丙磺舒）的缓冲液
4.可选择以下任一检测方式检测荧光强度
配备DAPI滤光片的荧光显微镜
配置紫外线/紫罗兰色激光器和450/40 nm滤光片的流式细胞仪
荧光酶标仪（激发/发射=360/450 nm，截止420 nm）
试剂应用文献
The zebrafish heart harbors a thermogenic beige fat depot analog of human epicardial adipose tissue
Authors: Morocho-Jaramillo, Paul-Andres and Kotlar-Goldaper, Ilan and Zakarauskas-Seth, Bhakti I and Purf{\"u}rst, Bettina and Filosa, Alessandro and Sawamiphak, Suphansa
Journal: Cell Reports (2024)
