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钙黄绿素, AM CAS 148504-34-1*超纯级*

英文名称:Calcein, AM *UltraPure grade* *CAS 148504-34-1*
产品参数
Ex (nm)501Em (nm)521
分子量994.86溶剂DMSO
存储条件在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品货期

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产品优势  

细胞渗透性好:可自由穿透活细胞膜,经水解后生成强荧光

 

适用范围

用于检测细胞活力

 

产品介绍

钙黄绿素-AM(Calcein-AM)是一种绿色荧光染料,用于流式细胞术和荧光显微镜技术中的活细胞染色以评估细胞活性。该染料是荧光探针钙黄绿素的乙酰甲酯(AM)形式。

钙黄绿素-AM染色无法固定。无论采用醛类还是甲醇固定法,染色模式均会丢失。此外,固定细胞因缺乏活性酯酶且膜完整性受损,无法完成染料转化与滞留。该染料仅适用于活细胞活性检测。

除真核细胞外,钙黄绿素-AM也可用于细菌活性检测,尤其适用于多种革兰氏阴性菌。细菌胞内微生物酯酶能将钙黄绿素-AM转化为荧光产物,其信号强度与活菌数量成正比,适用于微生物学、环境监测、药品无菌测试及食品植物检测等领域。

 

选择指南

Dye Calcein Blue CytoCalcein™ Violet 450 Calcein UltraBlue™ CytoCalcein™ Violet 500 Calcein UltraGreen™ Calcein Calcein Orange™ Calcein Red™ Calcein Deep Red™
原理 在活细胞中,非荧光钙黄绿素 AM 在细胞内酯酶的作用下 AM 酯水解后转化为荧光钙黄绿素产物。
荧光效果 活细胞具有高度荧光,很容易与无荧光的死细胞区分开。
Laser(nm) UV (350) Violet (405) UV (350) Violet (405) Blue (488) Blue (488) Green (532) Yellow (561-568) Red (633-647)
Ex/Em(nm) 354/441 406/445 359/458 420/505 492/514 501/521 531/545 562/576 643/663
是否复用
染料相容性 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容
样品类型 活细胞
适用仪器 荧光显微镜、荧光酶标仪、流式细胞仪
货号   22007 22012 21908 22013 21905 22003 22009 21900 22011

 

适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 488 nm
Em: 530/30  nm 
通道: FITC通道

 


荧光显微镜

Ex: FITC 滤波片组
Em: FITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板

 


荧光酶标仪

 
Ex: 490 nm
Em: 525 nm
Cutoff: 515 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
读取模式: 底读模式
实验方案

操作步骤

储备溶液配制

钙黄绿素及其衍生物通常以冻干粉形式提供,需用无水DMSO复溶为约1 mg/mL的储存液(如50 µg染料加入50 µL DMSO)。

工作液需用缓冲液(如HBSS)进一步稀释。钙黄绿素-AM水溶液易水解,建议当日使用。

 

实验操作流程

1.移除培养基,用无血清缓冲液洗涤细胞一次

2.加入Calcein AM工作液,37°C孵育30-60分钟

3.更换为HHBS或含阴离子转运抑制剂(如1 mM丙磺舒)的缓冲液

4.可选择以下任一检测方式检测荧光强度

配备FITC滤光片的荧光显微镜

配置蓝色激光器和5300/30 nm滤光片的流式细胞仪

 荧光酶标仪(激发/发射=490/525 nm,截止515 nm)

 

试剂应用文献

Silicon-rhodamine functionalized evocalcet probes (EvoSiR) potently and selectively label calcium sensing receptors (CaSR) in vitro, in vivo and ex vivo
Authors: Batora, Daniel and Fischer, Jerome P and Kaderli, Reto M and Varga, Mate and Lochner, Martin and Gertsch, Jurg
Journal: bioRxiv (2024): 2024--02
 
An ATPase-Mimicking MXene nanozyme pharmacologically breaks the ironclad defense system for ferroptosis cancer therapy
Authors: Wang, Huan and Liu, Xinchen and Yan, Xiangyu and Du, Yong and Pu, Fang and Ren, Jinsong and Qu, Xiaogang
Journal: Biomaterials (2024): 122523
 
Elucidating the distinctive regulatory effects and mechanisms of active compounds in Salvia miltiorrhiza Bunge via network pharmacology: Unveiling their roles in the modulation of platelet activation and thrombus formation
Authors: Zhang, Ying and Xin, Guang and Zhou, Qilong and Yu, Xiuxian and Feng, Lijuan and Wen, Ao and Zhang, Kun and Wen, Tingyu and Zhou, Xiaoli and Wu, Qiuling and others,
Journal: Toxicology and Applied Pharmacology (2024): 116871
 
Reinforced Immunogenic Endoplasmic Reticulum Stress and Oxidative Stress via an Orchestrated Nanophotoinducer to Boost Cancer Photoimmunotherapy
Authors: Yang, Zhenzhen and Teng, Yulu and Lin, Meng and Peng, Yiwei and Du, Yitian and Sun, Qi and Gao, Datong and Yuan, Quan and Zhou, Yu and Yang, Yiliang and others,
Journal: ACS nano (2024)