活细胞荧光示踪探针CFSE CAS 150347-59-4
| Ex (nm) | 498 | Em (nm) | 517 |
| 分子量 | 557.46 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
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产品特点
CFSE（羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯）是一种细胞可渗透性荧光染料，可共价标记细胞内蛋白质，通过流式细胞术中荧光的逐步稀释实现多世代细胞增殖示踪。
细胞增殖示踪：每次细胞分裂荧光强度减半
细胞内蛋白质标记：细胞可渗透性染料共价结合胞质蛋白，实现长期保留
488 nm 激光激发：兼容流式细胞术和显微镜中标准 FITC 通道、
CMFDA 的替代方案：相较于传统增殖染料，在稳定性与毒性方面具有优势
适用范围
可共价标记细胞内蛋白质，通过流式细胞术中荧光的逐步稀释实现多世代细胞增殖示踪
产品介绍
CFSE 是一种细胞可渗透的绿色荧光示踪剂，适用于流式细胞术平台中的多世代增殖分析，其激发峰在 498 nm，发射峰在 517 nm。
CFSE（羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯）是一种非荧光染料，可用于追踪多个世代的细胞增殖。它具有细胞可渗透性，能够穿过活细胞膜。进入细胞后，分子上的乙酸酯基团被细胞内非特异性酯酶切割，产生荧光产物并在细胞内积累。非存活细胞不具有活性酯酶，其泄漏的细胞膜也无法保留染料，因此保持非荧光状态。活化后的 CFSE 染料与表面及细胞内蛋白质上暴露的游离伯胺基团（如赖氨酸侧链）形成共价键。这意味着 CFSE 标记可用于跨多个分裂世代的特定细胞的追踪、计数和鉴定。
CFSE（荧光素，CFDA，SE）是一种荧光化合物，激发峰在 498 nm，发射峰在 517 nm。它可被 488 nm 氩激光谱线有效激发。可使用流式细胞仪的 FL1 通道或 FITC 滤光片组监测其发射。
样品方案分析
概述
用测试化合物制备细胞
添加0.5到5μMCFSE配制工作溶液
在室温或37℃下将染料与细胞一起孵育10到30分钟
去除染料工作溶液
使用Ex / Em = 490/520 nm（FL1通道）的流式细胞仪进行分析
注意：以下是我们推荐的活细胞方案。 它仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。
操作步骤
1.准备10 mM DMSO储备溶液
产品＃22022：将5.6mg溶于1ml DMSO中以制备10mM储备溶液（1mg / ml相当于1.8mM）;
产品＃22028，向每个小瓶中加入90μLDMSO以制备10mM储备溶液。
注意：请及时使用储备液并且将剩余的溶液等分储存，并在<-20℃避光冷冻。避免反复冻融
2.准备CFSE工作溶液
使用之前，用Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或其他缓冲液（pH7）稀释步骤1中的DMSO储备液（20,000至2,000次），准备CFSE工作溶液（0.5至5μM）并离心。
3.用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞：
3.1用测试化合物细胞培养一段时间。
3.2离心细胞，每管取1-5×105个细胞。
3.3在500μL染料工作溶液中重悬细胞（来自步骤2）。
3.4在室温或37°C下用染料溶液孵育细胞10到30分钟，避光。
3.5从细胞中取出染料工作溶液，用HHBS或其他缓冲液清洗细胞。将细胞重悬于500μL预热的HHBS或培养基中，得到每管1-5×105个细胞。
3.6用流式细胞仪（FL1通道）或荧光显微镜观察Ex / Em = 490 / 520nm处的荧光变化。
试剂应用文献
