细胞膜荧光探针DiR,碘化物 CAS 100068-60-8

产品货期

现货

产品优势  

DiR是一种疏水性荧光染料，可特异性标记细胞膜及其他疏水性结构

适用范围

用于标记细胞膜

产品介绍

DiR染料是一种近红外（NIR）荧光探针，专为活细胞质膜标记设计，适用于共聚焦显微镜或小动物活体成像等研究应用。该染料通过结合两条C18烃链（实现稳定的膜锚定）与发射波长约775-785 nm的三碳菁骨架，能有效降低背景自发荧光并提升形态保真度。由于近红外激发能量低于可见光波长，该技术可减少光漂白现象并降低细胞应激反应。带有延长烃链结构的碳菁类似物可在细胞膜中滞留数小时至数天，无需重复染色即可支持多小时延时实验。

DiR的发射光谱范围还能避免与标准GFP/RFP通道重叠，使得近红外标记与荧光细胞周期报告基因的多参数实验成为可能。此外，近红外成像在结肠上皮等器官中已证实具有更强的组织穿透力和更弱的光散射效应（Okada, 2013），从而为类器官或胚胎系统提供更清晰的三维可视化效果。

DiR染料兼具稳定的双层膜结合能力、较低的光毒性，以及与可见光荧光基团的极小光谱干扰，使其成为脆弱或复杂组织环境中长期、低背景标记的理想解决方案。该染料兼容配备近红外通道的现代成像系统，可显著提升组织穿透深度并减少光谱干扰。

细胞膜荧光探针（DiO/DiI/DiD/DiS/DiR）标记操作流程

DiO，DiI，DiD，DiS或DiR膜染色溶液：

DMSO或EtOH储备液：

使用DMSO或乙醇配制1-5 mM储备液

注意：未使用的母液需-20℃避光保存，避免反复冻融

工作溶液：

用无血清培养基、HBSS或PBS稀释储备液，配制1-5 μM工作液

注意：合适的工作浓度需根据细胞类型优化，建议测试至少10倍浓度梯度

悬浮细胞

1. 将细胞以1×10⁶/mL的密度悬浮于染料工作液中

2. 37℃孵育2-20分钟（不同细胞类型需优化时间，建议从20分钟开始测试）

3. 1000-1500 rpm离心5分钟

4.取出上清液，将细胞重新悬浮在预热（37°C）的生长培养基中

5.重复洗涤2次（步骤同3-4）

 贴壁细胞

1.在无菌玻璃盖玻片上培养贴壁细胞。

2.从生长培养基中取出盖玻片，轻轻地沥出多余的培养基。 将盖玻片放在湿度箱中。

3.加入100 μL染料工作液，轻摇使液体覆盖全部细胞

4. 37°C孵育2-20分钟。 （不同细胞类型需优化时间，建议从20分钟开始测试）

5.排出染料工作溶液，用生长培养基清洗盖玻片2-3次。（每次加入培养基后孵育5-10分钟）

4.显微镜检测：

1.说明书中的表1总结了DiD，DiO，DiI，DiS和DiR滤波器组的选择。

2.为了同时检测多种染料，可提供如下多波段滤波器组：

a）DiI和DiO = Omega XF52，Chroma 51004

b）DiI和DiD = Omega XF92，Chroma 51007

c）DiI，DiO和DiD = Omega XF93，Chroma 61005

5.流式细胞仪检测：

各染料对应检测通道：

DiO→FL1 | DiI→FL2 | DiD→FL3 | DiS/DiR→FL4

试剂应用文献