MycoLight 细菌活力检测试剂盒
| Ex (nm) | 482 | Em (nm) | 512 |
| 分子量 | - | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品货期
现货
产品优势
具有革兰氏阳性菌和阴性菌的双色荧光活力检测方案
适用范围
监测细菌活力
产品介绍
AAT Bioquest的Mycolight™细菌活力检测试剂盒提供针对革兰氏阳性菌和阴性菌的双色荧光活力检测方案。该试剂盒采用的绿色荧光核酸染料MycoLight™ Green与红色荧光核酸染料碘化丙啶（propidium iodide）的混合体系。当单独使用时，MycoLight™ Green通常可标记样本中所有细菌（活菌与死菌）；而碘化丙啶仅能进入细胞膜受损的细菌，当两种染料共存时会导致MycoLight™ Green荧光减弱。
通过优化配比的MycoLight™ Green与碘化丙啶混合染料，具有完整细胞膜的活菌将显示绿色荧光，而细胞膜受损的死菌或濒死菌则呈现红色荧光。该试剂盒通过检测细胞膜完整性变化，成为监测细菌群体活力的可靠工具。
经染色的细菌可在488 nm（最常用激发光源）激发下，分别通过510-530 nm（FITC滤光片）和600-660 nm（Texas Red滤光片）通道进行荧光检测。
适用仪器
| 流式细胞仪 | |
| Ex: | 488 nm |
| Em： | 530/30 nm, 610/20 nm |
| 通道: | FITC, PE-Texas Red 通道 |
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荧光显微镜 |
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| Ex: | 510/600 nm |
| Em： | 530/660 nm |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 通道: | FITC/Texas Red 通道 |
重要提示
实验前请将试剂盒组分置于室温解冻，并短暂离心后使用。
检测范围说明
本试剂盒已在以下对数生长期细菌物种中通过测试：
已验证菌种：蜡样芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、产气荚膜梭菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、藤黄微球菌、草分枝杆菌、铜绿假单胞菌、丁香假单胞菌、奥拉宁堡沙门氏菌、粘质沙雷氏菌、宋内志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌。
扩展测试菌种：根癌农杆菌、鲫爱德华氏菌、尤里普拉斯马菌、乳酸杆菌属、人型支原体、丙酸杆菌属、奇异变形杆菌、发酵接合酵母菌属。
工作液配制
染料工作液（250X）：
取等体积的MycoLight™ Green（组分A）与碘化丙啶（组分B）于微量离心管中，充分混匀。
注意：工作液需现用现配。
实验操作步骤
1.使用适宜培养基培养细菌（对数生长期菌液效果最佳）。用0.85% NaCl或合适缓冲液将菌液稀释至约10⁶–10⁸ cells/mL。
流式检测需准备≥500 µL/样本，96孔板检测需≥100 µL/样本。
注意：染色前需去除培养基残留，通常一次洗涤即可有效清除干扰成分。避免使用磷酸盐洗涤缓冲液，可能降低染色效率。
2.每mL菌悬液中加入4 µL染料工作液（250X），混匀后室温避光孵育15分钟。
3.染色后的细菌可通过荧光显微镜、荧光酶标仪或流式细胞仪进行分析。
4.使用标准FITC长通滤光片组可同步观察活/死菌荧光； 或分别通过FITC（活菌-绿色荧光）和Texas Red（死菌-红色荧光）滤光片组进行独立观测。
试剂应用文献
