MycoLight 活细菌荧光成像试剂盒
| Ex (nm) | 498 | Em (nm) | 526 |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
产品货期
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产品优势
1.信号更强且更稳定
2.背景荧光低
3.染色流程更简便
产品介绍
MycoLight™ 活菌荧光成像试剂盒为通过荧光显微镜观察活菌提供了一种简便快捷的解决方案。该试剂盒采用的MycoLight™ 520是一种非荧光酯酶底物，可渗透至革兰氏阳性菌与阴性菌内部。经细菌细胞内非特异性酯酶水解后，该底物会生成绿色荧光产物并累积于菌体内。
与常用的酯酶底物CFDA和CFDA-AM相比，本试剂盒能提供更明亮稳定的荧光信号，同时具有背景荧光更低、染色流程更简便的优势。
适用仪器
| 荧光显微镜 | |
| Ex: | 488 nm |
| Em： | 530 nm |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 通道: | FITC 通道 |
样品实验方案
简要概述
1.准备100X染料储备溶液
2.准备细菌样品
3.添加MycoLight 520
4.将细菌样品与MycoLight 520信号增强避光于37°C孵育5-10分钟或在室温下孵育60分钟
5.通过带有FITC滤光片组的荧光显微镜分析样品
溶液配制
储备溶液配制
所有未使用的储备液应分装为单次用量并于-20°C冻存，避免反复冻融。
MycoLight 520储备液（100X）：
向MycoLight™ 520（组分A）瓶中加入100 µL DMSO（组分D），配制为100X储备液。
样品示例及操作
1.将对数生长后期的细菌浓度调整至10⁶-10⁸ cells/mL，用 assay buffer（组分C）重悬离心沉淀（10,000 × g，10分钟）。
注意：可通过OD600值换算细胞数（大肠杆菌OD600=1.0约等于8×10⁸ cells/mL）*
2.对细胞进行所需处理后，再次离心重悬，保持处理组与活菌组浓度一致。
*注：死菌对照建议采用70%乙醇处理30分钟+沸水浴60分钟制备*
3.向90 µL菌悬液中加入1 µL 100X MycoLight™ 520储备液与10 µL 10X信号增强剂（组分B）。
4.避光条件下，37°C孵育5-10分钟或室温孵育60分钟。。
5.通过FITC通道（Ex/Em=488/530 nm）观察细菌荧光。
注：本方案同样适用于酶标仪检测
试剂应用文献
