MycoLight 快速荧光革兰氏阳性细菌染色试剂盒
| Ex (nm) | - | Em (nm) | - |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
产品货期
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产品优势
一步法荧光检测技术，简化了繁琐操作
产品介绍
AAT Bioquest 的 MycoLight 快速荧光革兰氏阳性细菌染色试剂盒采用创新型一步法荧光检测技术，可用于活体细菌的革兰氏属性判定。
革兰氏染色法是临床及科研领域中细菌分类鉴定的重要且广泛应用的技术。传统染色方法需经过热固定、双步染色、酒精脱色及复染等多道工序，易导致染色结果不一致。
AAT Bioquest 的一步法试剂盒通过简化繁琐操作，有效解决了现有技术痛点。该试剂盒采用荧光标记伴刀豆球蛋白 A（ConA）——一种可特异性结合革兰氏阳性菌表面裸露N-乙酰葡糖胺的凝集素。当革兰氏阴性菌与阳性菌共同经荧光标记ConA复合物染色时，仅革兰氏阳性菌会呈现红色荧光。染色结果可通过荧光检测仪进行观测。
MycoLight 快速荧光革兰氏阳性细菌染色试剂盒所用荧光标记ConA复合物具有更高亮度及光稳定性，其性能优于现有其他染料，使产品兼具可靠性与便捷性。
适用仪器
| 荧光显微镜 | |
| Ex: | 650 nm |
| Em： | 669 nm |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 滤波片组: | Cy5 滤波片组 |
样品实验方案
简要概述
1.准备细菌样本
2.准备并添加IF647-ConA
3.在室温、避光条件下，将细菌样本与 IF647-ConA 孵育 5-15 分钟
4.移除IF647-ConA染色溶液并重悬于测定缓冲液中
5.使用Cy5滤光片组通过荧光显微镜分析样品
溶液制备
储备溶液配制
除非另有说明，所有配制好的未使用的储备液应分装成单次使用量的小份，于 -20 °C 保存，并避免反复冻融。
IF647-ConA储备溶液（100X）：
向IF647-ConA小瓶（组分A）中加入100 µL测定缓冲液（组分B），并充分混合。
注意：储备液应避光保存于 -20 °C，建议分装小份储存以避免反复冻融。。
样品示例及操作
细菌样品的制备
1.在适当的培养基中使细菌生长到对数后期。 准备细菌样品，浓度范围为106到108个细胞/ mL。
注意：通过测定细菌培养物在 600 nm 波长下的光密度（OD₆₀₀）确定细胞数量。对于大肠杆菌（E. coli）培养物，OD₆₀₀=1.0 时相当于 8×10⁸个细胞 / ml。
2.通过以10,000 x g离心5分钟除去培养基，然后将沉淀重新悬浮在测定缓冲液（组分B）中。
染色方案
1.向100 µL细菌样品中加入1 µL IF647-ConA储备溶液（100X）。
2.充分混合，然后在室温下于黑暗中孵育5-15分钟。
3.以10,000 x g离心5分钟，然后除去IF647-ConA染色溶液。
4.重悬于100 µL分析缓冲液（组分B）中。
5.使用荧光显微镜通过Cy5（Ex / Em = 650/669 nm）通道监控细菌的荧光。
注：本方案仅为操作指南，针对不同细菌菌株或其他特定需求，需对方案进行优化。若观察到较高背景荧光，可在成像前增加一个用检测缓冲液（组分 B）洗涤的步骤（该步骤为可选）。
试剂应用文献
