LysoBrite 溶酶体深红色荧光探针

产品货期

咨询

 

产品优势  

1.特异性强：利用溶酶体 pH 梯度，选择性积聚在溶酶体，实现特异性染色

2.荧光特性好：信噪比高，光稳定性强，进入溶酶体后荧光显著增强

3.细胞适用性广：适用于增殖与非增殖细胞，以及悬浮细胞和贴壁细胞

 

适用范围

用于标记活细胞

 

产品介绍

溶酶体是细胞内含有酸性水解酶的细胞器，主要负责降解代谢废物和细胞残骸。它能分解多余或老化的细胞器、食物颗粒以及被吞噬的病毒和细菌。溶酶体膜为其内部的消化酶提供了pH4.5的最佳工作环境。相较于弱碱性的细胞质（pH7.2），溶酶体内部维持着酸性环境（pH4.5-4.8）。这种pH差异的维持依赖于溶酶体膜上的质子泵和氯离子通道，它们能够持续将质子从细胞质转运至溶酶体内部。

LysoBrite 深红色染料通过溶酶体pH梯度特异性富集。这种疏水性探针可自由穿透活细胞膜，进入细胞后被溶酶体捕获，并在溶酶体内产生显著增强的荧光信号。其独特的染色特性使背景信号低，适用于细胞粘附、趋化运动、多药耐药、细胞活力、凋亡及细胞毒性等多种研究。该染料对增殖和非增殖细胞均适用，可同时用于悬浮和贴壁细胞。

 

注意事项

标记后不能固定细胞

使用LysoBrite Deep Red染料的分析方案

概述

准备细胞

添加染料工作溶液

在37°C孵育30分钟

洗涤细胞

在荧光显微镜下分析

 

LysoBrite™ Deep Red工作液配制：

1.解冻 LysoBrite Deep Red染料至室温。

2.将20μL的500 X LysoBrite Deep Red染料，用10 mL 含 20 mM HEPES 的 Hank's 缓冲液（HBSS）或您选择的其他缓冲液进行稀释。

注意：1. 20μL的LysoBrite Deep Red染料足够用于一块96孔板。将未使用完的LysoBrite Deep Red染料原液进行分装＜-15 ℃避光保存。避免反复冻融。

          2.荧光溶酶体指示剂的浓度根据具体应用而变化。 可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。

 

样品实验方案

（本方案仅提供指导原则，应根据您的具体需求进行调整。）

贴壁细胞染色方案

1. 使用96孔黑色壁/透明底板（每孔100μL培养基）或于培养皿内的盖玻片上培养

2. 待细胞达到目标汇合度后，加入等体积染色工作液（按"工作液配制"步骤2制备）

3. 37°C、5% CO₂培养箱中孵育30分钟

4. 用预热（37°C）的HBSS（含20mM HEPES）或自选缓冲液洗涤两次，最后加入HBSS或完全培养基

5. 使用配备所需滤光片组的荧光显微镜观察

注：若染色效果欠佳，可适当提高染料浓度或延长孵育时间  

 

悬浮细胞染色方案

1. 直接加入等体积染色工作液（按"工作液配制"步骤2制备）

2. 37°C、5% CO₂培养箱中孵育30分钟

3. 用预热（37°C）的HBSS（含20mM HEPES）或自选缓冲液洗涤两次，最后加入HBSS或完全培养基

4. 使用配备所需滤光片组的荧光显微镜观察

注：1.若染色效果欠佳，可适当提高染料浓度或延长孵育时间  

       2.悬浮细胞可通过BD Cell-Tak®（BD Biosciences）处理贴附于盖玻片后，参照贴壁细胞方案染色