LysoBrite 溶酶体红色 DND-99荧光探针

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产品优势  

1.荧光特性好：信噪比高，光稳定性强，进入溶酶体后荧光显著增强

2.细胞适用性广：适用于增殖与非增殖细胞，以及悬浮细胞和贴壁细胞

 

适用范围

用于标记活细胞

 

产品介绍

LysoBrite Red DND-99在化学结构上与LysoTracker® Red DND-99（ThermoFisher公司注册商标）完全相同，均适用于活细胞中酸性细胞器的标记与追踪。该染料对酸性细胞器具有好的选择性。LysoBrite™系列探针由荧光基团与弱碱性基团偶联而成，其特性在于中性pH条件下仅部分质子化，从而能够自由穿透细胞膜实现活细胞标记。

使用LysoBrite Red DND-99染料的分析方案

概述

准备细胞

添加染料工作溶液

在37°C孵育30分钟

洗涤细胞

在荧光显微镜下分析

储存条件

LysoBrite™ Red DND-99原液为500倍DMSO浓缩液，需在-20℃避光条件下保存，有效期至少6个月。使用时请注意避免反复冻融，以确保试剂稳定性。

 

LysoBrite™ Red DND-99工作液配制：

1.解冻 LysoBrite Red DND-99染料至室温。

2.将20μL的500 X LysoBrite Red DND-99染料，用10 mL 含 20 mM HEPES 的 Hank's 缓冲液（HBSS）或您选择的其他缓冲液进行稀释。

注意：1. 20μL的LysoBrite Red DND-99染料足够用于一块96孔板。将未使用完的LysoBrite Red DND-99染料原液进行分装＜-15 ℃避光保存。避免反复冻融。

          2.荧光溶酶体指示剂的浓度根据具体应用而变化。 可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。

 

样品实验方案

（本方案仅提供指导原则，应根据您的具体需求进行调整。）

贴壁细胞染色方案

1. 使用96孔黑色壁/透明底板（每孔100μL培养基）或于培养皿内的盖玻片上培养

2. 待细胞达到目标汇合度后，加入等体积染色工作液（按"工作液配制"步骤2制备）

3. 37°C、5% CO₂培养箱中孵育30分钟

4. 用预热（37°C）的HBSS（含20mM HEPES）或自选缓冲液洗涤两次，最后加入HBSS或完全培养基

5. 使用配备所需滤光片组的荧光显微镜观察

注：若染色效果欠佳，可适当提高染料浓度或延长孵育时间  

 

悬浮细胞染色方案

1. 直接加入等体积染色工作液（按"工作液配制"步骤2制备）

2. 37°C、5% CO₂培养箱中孵育30分钟

3. 用预热（37°C）的HBSS（含20mM HEPES）或自选缓冲液洗涤两次，最后加入HBSS或完全培养基

4. 使用配备所需滤光片组的荧光显微镜观察

注：1.若染色效果欠佳，可适当提高染料浓度或延长孵育时间  

       2.悬浮细胞可通过BD Cell-Tak®（BD Biosciences）处理贴附于盖玻片后，参照贴壁细胞方案染色