Cell Navigator™溶酶体标记试剂盒 *红色荧光*
货号22658存储条件F/L
规格500 Tests价格1740
Ex (nm)575Em (nm)597
分子量溶剂
产品详细介绍


简要概述

溶酶体是细胞器,其含有酸水解酶以分解废弃物和细胞碎片。溶酶体消化多余的或破旧的细胞器,食物颗粒和吞噬的病毒或细菌。溶酶体周围的膜允许消化酶在pH4.5下工作。与微碱性胞质溶胶(pH 7.2)相比,溶酶体的内部是酸性的(pH 4.5-4.8)。溶酶体通过质子泵和氯离子通道从细胞质中泵送质子穿过膜来维持这种pH差异。

 

我们的Cell Navigator荧光成像试剂盒是一套荧光成像工具,用于标记亚细胞细胞器,如膜,溶酶体,线粒体,细胞核等。活细胞区的选择性标记为研究空间细胞事件提供了一种强大的方法。和时间背景。该特定试剂盒设计用于在Ex / Em = 575 / 600nm处以红色荧光标记活细胞的溶酶体。试剂盒中使用的专有溶解性染料可能通过溶酶体pH梯度选择性地在溶酶体中积累。溶致指示剂是一种疏水性化合物,易于渗透完整的活细胞,并在进入细胞后被捕获在溶酶体中。进入溶酶体后,其荧光显着增强。该试剂盒中使用的LysoBriteRed染料具有极高的光稳定性和优异的细胞保留性,可用于各种研究,包括细胞粘附,趋化性,多药耐药性,细胞活力,细胞凋亡和细胞毒性。它适用于增殖和非增殖细胞,可用于悬浮细胞和贴壁细胞。

 

分析方案

 

概述

 

准备细胞添加染料工作溶液

37°C孵育30分钟洗涤细胞

在荧光显微镜下在Ex / Em = 575/600 nm(TRITC过滤器组)进行分析

 

1.制备溶酶体染色溶液:

 

1.1Warm LysoBriteRed(组分A)至室温。

 

1.2通过将20μLLysoBriteRed(组分A)稀释至10 mL活细胞染色缓冲液(组分B),制备染料工作溶液。

注意1:对于一个96孔板,20μL的LysoBriteRed(组分A)就足够了。 将未使用的LysoBrite红色(组分A)等分并储存在<-20 ℃。 保护它免受光照,避免反复冻融循环。

注意2:荧光溶酶体指示剂的最佳浓度根据具体应用而变化。 可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。

 

2.准备和染色细胞:

 

2.1对于粘附细胞:在96孔黑色壁/透明底板(100μL/孔/ 96孔板)中或在装有适当培养基的培养皿内的盖玻片上培养细胞。 当细胞达到所需的汇合时,加入等体积的染料加工溶液(来自步骤1.2)。 将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育30分钟。 用预热(37℃)Hanks和20mM Hepes缓冲液(HBSS)或您选择的缓冲液洗涤细胞两次,用HBSS或生长培养基填充细胞孔。 使用配有TRITC过滤器组的荧光显微镜观察细胞。

注意:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或孵育时间以使染料积累。

 

2.2对于悬浮细胞:将等体积的染料加工溶液(来自步骤1.2)加入细胞中。 将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育30分钟。 用预热(37℃)Hanks和20mM Hepes缓冲液(HBSS)或您选择的缓冲液洗涤细胞两次,用HBSS或生长培养基填充细胞孔。 使用配备TRITC过滤器组的荧光显微镜观察细胞。

注意1:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或培养时间以使染料积累。

注意2:悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®BD Biosciences)处理过的盖玻片上,并作为粘附细胞染色(见步骤2.1)。



说明书
Cell Navigator™溶酶体标记试剂盒 *红色荧光*.pdf