MitoLite 线粒体近红外荧光探针（FX690）

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产品优势  

1.高特异性：依赖于线粒体膜电位（ΔΨm）选择性积聚在活性线粒体中

2.细胞兼容性：适用于增殖细胞、非增殖细胞，兼容悬浮细胞和贴壁细胞的检测。

3.稳定性好：抗光漂白能力强，适合长时间活细胞成像

4.高信噪比：与普通细胞质染料相比，信噪比更高，成像更清晰

 

适用范围

用于标记活细胞

 

产品介绍

MitoLite 线粒体近红外荧光探针是一种阳离子染料，能够通过线粒体膜电位梯度选择性地在线粒体内积聚。该线粒体荧光指示剂是一种疏水性化合物，可轻松穿透完整活细胞的细胞膜，进入细胞后被捕获在线粒体中。由于该指示剂带有细胞滞留基团，能够在线粒体内长时间保留，这一关键特性提高了其染色效率。其标记方案稳定可靠，操作简便耗时短，可用于多种荧光检测平台，包括微孔板检测、免疫细胞化学和流式细胞术等，既适用于增殖细胞也适用于非增殖细胞，同时兼容悬浮细胞和贴壁细胞的检测。

 

注意事项

该产品可以在染色后，进行固定，在观察

MitoLite 染料的分析方案

概述

准备细胞

添加染料工作溶液

在37°C孵育30分钟至2小时

清洗细胞

在荧光显微镜下分析

 

操作步骤

1.线粒体染色工作液配制：

1.1 将MitoLite™染料恢复至室温

1.2 取20 μL 500×MitoLite™染料母液，用Hanks（含20 mM Hepes缓冲液）或自选缓冲液稀释至10 mL，配制成工作浓度

注1：20 μL染料母液可满足1块96孔板使用。未使用的母液需分装后于-15℃以下避光保存，避免反复冻融

注2：理想染色浓度需根据具体应用调整，可根据细胞类型及探针渗透性优化染色条件

 

2.细胞染色步骤：

2.1 贴壁细胞染色：

a) 将细胞培养于96孔黑色壁/透明底培养板（100 μL/孔）或培养皿内的盖玻片上

b) 待细胞达到合适密度后，加入等体积染色工作液（步骤1.2配制）

c)将细胞在 37℃、5% CO₂培养箱中孵育30分钟至2小时

d) 更换染料上样溶液，或用预热（37℃）的Hanks（含20 mM Hepes缓冲液，HBSS）或自选缓冲液（如1:1稀释的培养基）洗涤细胞（特别是货号#22679产品）。随后向细胞培养孔中加入HBSS缓冲液或培养基。

e) 使用适配滤光片的荧光显微镜观察细胞

注意：若染色不足，可适当提高染料浓度或延长孵育时间  

2.2 悬浮细胞染色：

a) 1000 rpm离心5分钟收集细胞，弃上清

b) 用预热（37℃）培养基重悬细胞，加入等体积染色工作液（步骤1.2）

c) 将细胞在37℃、5% CO₂培养箱中孵育30分钟至2小时

d) 更换染料上样溶液，或用预热（37℃）的Hanks（含20 mM Hepes缓冲液，HBSS）或自选缓冲液（如1:1稀释的培养基）洗涤细胞（特别是货号#22679产品）。随后向细胞培养孔中加入HBSS缓冲液或培养基。

e) 使用适配滤光片的荧光显微镜观察细胞

注意：1.若染色不足，可适当提高染料浓度或延长孵育时间

          2.悬浮细胞可使用BD Cell-Tak®（BD Biosciences）处理盖玻片后，参照贴壁细胞方法染色