MitoLite 线粒体绿色荧光探针
货号22695存储条件F/L
规格10x50 ug价格1740
Ex (nm)491Em (nm)513
分子量671.88溶剂DMSO
产品详细介绍


简要概述

        MitoLite 线粒体绿色荧光探针是美国AAT Bioquest生产的用于染色线粒体的荧光探针,MitoLite Green FM与MitoTracker Green FM(M7514,ThermoFisher)是同一分子。它是绿色荧光的线粒体染色剂。与其他MitoLite探针不同,MitoLite Green FM似乎定位于线粒体,取决于线粒体膜电位的情况要少得多。该染料会污染活细胞,但醛固定后不能很好地保留。它是少数可以染色死细胞线粒体的线粒体探针之一。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的MitoLite 线粒体绿色荧光探针。

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备1 mM MitoLite Green FM储备溶液
2.准备20-200 nM MitoLite Green FM染色液
3.从细胞中去除生长培养基
4.向细胞添加MitoLite Green FM染色液
5.在37°C孵育30分钟
6.洗涤细胞并用1x Hanks和20mM Hepes Buffer(HH缓冲液)代替
7.使用带有FITC滤光片组的荧光显微镜观察细胞

 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
MitoLite Green FM储备溶液:
将一小瓶MitoLite Green FM(50 ug)溶于74 uL优质无水二甲基亚砜(DMSO)中,制成1 mM储备液。 注意:将储备溶液保持在≤–15°C的温度下冷冻并避光。

 

2.工作溶液配制

MitoLite Green FM染色液:
在HH缓冲液中稀释1 mM MitoLite Green FM储备溶液至最终工作浓度。 工作浓度可以在20–200 nM的范围内。

 

样品示例及操作

1.染色贴壁细胞:

1.1生长细胞以达到所需的融合度。

1.2从细胞中去除生长培养基。

1.3向每个孔中添加MitoLite Green FM染色溶液。

1.4在37°C下孵育30分钟。

1.5洗涤细胞,并用1x Hanks和20mM Hepes Buffer(HH缓冲液)代替。

1.6使用带有FITC滤光片组的荧光显微镜观察细胞。 注意:染色方案对Hela细胞系有益,可能需要针对特定细胞类型进行优化。
 
2.染色悬浮细胞:

2.1离心细胞至沉淀并吸出上清液。

2.2在MitoLite Green FM染色溶液中轻轻重悬细胞。

2.3在37°C下孵育30分钟。

2.4离心细胞,除去上清液,然后将细胞重悬在新鲜的HH缓冲液中。

2.5可以通过流式细胞仪(530/30 nm滤光片-FITC通道)或荧光显微镜(FITC滤光片组)分析细胞。
 
 

图1 使用带有FITC滤光片组(绿色)的荧光显微镜,用MitoLite Green FM染色的HeLa细胞的荧光图像。 活细胞与溶酶体染料LysoBrite Red(Cat#22645,红色)和细胞核染料Nuclear Violet LCS1(Cat#17543,蓝色)共同染色。

 

参考文献

the influence of platelets and a comparison of analytical approaches
Authors: Hopkinson, K.; Williams, E. A.; Fairburn, B.; Forster, S.; Flower, D. J.; Saxton, J. M.; Pockley, A. G., A MitoTracker Green-based flow cytometric assay for natural killer cell activity: variability
Journal: Exp Hematol (2007): 350-7

Efficacy of MitoTracker Green and CMXrosamine to measure changes in mitochondrial membrane potentials in living cells and tissues
Authors: Pendergrass, W.; Wolf, N.; Poot, M.
Journal: Cytometry A (2004): 162-9

Mitotracker green is a P-glycoprotein substrate
Authors: Marques-Santos, L. F.; Oliveira, J. G.; Maia, R. C.; Rumjanek, V. M.
Journal: Biosci Rep (2003): 199-212

MitoTracker Green labeling of mitochondrial proteins and their subsequent analysis by capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection
Authors: Presley, A. D.; Fuller, K. M.; Arriaga, E. A.
Journal: J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci (2003): 141-50

and MitoTracker Green is affected by mitochondrial membrane potential altering drugs
Authors: Keij, J. F.; Bell-Prince, C.; Steinkamp, J. A., Staining of mitochondrial membranes with 10-nonyl acridine orange, MitoFluor Green
Journal: Cytometry (2000): 203-10

 

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说明书
MitoLite 线粒体绿色荧光探针.pdf