MitoLite 线粒体绿色荧光探针（FM）
英文名称：MitoLite™ Green FM
产品参数
| Ex (nm) | 508 | Em (nm) | 528 |
| 分子量 | 671.88 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品概述
产品货期
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产品优势
1.即用型配方操作便捷性
2.信噪比更高，成像更清晰
适用范围
用于标记活细胞
产品介绍
MitoLite™ Green FM 与 ThermoFisher 公司的 MitoTracker Green FM（货号 M7514）为同一分子，是一种绿色荧光线粒体染色剂。与其他 MitoLite 探针不同，MitoLite™ Green FM 虽定位于线粒体，但其定位对线粒体膜电位的依赖性显著降低。该染料适用于活细胞染色，但在醛类固定后保留效果较差。
适用仪器
| 流式细胞仪 | |
| Ex: | 488 nm |
| Em： | 530/30 nm |
| 通道: | FITC 通道 |
|
荧光显微镜 |
|
| Ex: | FITC 滤波片组 |
| Em： | FITC 滤波片组 |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
实验方案
样品实验方案
简要概述
1.配置1 mM MitoLite Green FM储备溶液
2.用缓冲液稀释制备20-200 nM MitoLite Green FM染色液
3.从细胞中去除生长培养基
4.向细胞添加MitoLite Green FM染色液
5.在37°C孵育30分钟
6.洗涤细胞并用1x Hanks和20mM Hepes BufferHH缓冲液（含20 mM Hepes的Hanks缓冲液）代替
7.使用FITC滤光片组的荧光显微镜观察细胞
溶液配制
1.储备溶液配制
所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免反复冻融。
MitoLite Green FM储备溶液（1 mM）：
取50ug MitoLite Green FM 溶于74 uL无水DMSO中，制成1 mM储备液。
注意：分装后避光保存于≤–15°C，避免反复冻融。
2.工作溶液配制
MitoLite Green FM染色液：
在HH缓冲液中稀释1 mM MitoLite Green FM储备溶液至工作浓度。 工作浓度可以在20–200 nM的范围内。
样品示例及操作
1.染色贴壁细胞：
1.1生长细胞以达到合适密度。
1.2从细胞中去除生长培养基。
1.3向每个孔中添加MitoLite Green FM染色溶液。
1.4在37°C下孵育30分钟。
1.5洗涤细胞，并用1x Hanks和20mM Hepes Buffer（HH缓冲液）代替。
1.6使用FITC滤光片组的荧光显微镜观察细胞。
1.1生长细胞以达到合适密度。
1.2从细胞中去除生长培养基。
1.3向每个孔中添加MitoLite Green FM染色溶液。
1.4在37°C下孵育30分钟。
1.5洗涤细胞，并用1x Hanks和20mM Hepes Buffer（HH缓冲液）代替。
1.6使用FITC滤光片组的荧光显微镜观察细胞。
注意：染色方案对Hela细胞系有益，可能需要针对特定细胞类型进行优化。
2.染色悬浮细胞：
2.1离心收集细胞，弃清液。
2.2在MitoLite Green FM染色溶液中轻轻重悬细胞。
2.3在37°C下孵育30分钟。
2.4离心细胞，除去上清液，然后将细胞重悬在新鲜的HH缓冲液中。
2.5通过流式细胞仪（530/30 nm滤光片-FITC通道）或荧光显微镜（FITC滤光片组）分析细胞。
2.1离心收集细胞，弃清液。
2.2在MitoLite Green FM染色溶液中轻轻重悬细胞。
2.3在37°C下孵育30分钟。
2.4离心细胞，除去上清液，然后将细胞重悬在新鲜的HH缓冲液中。
2.5通过流式细胞仪（530/30 nm滤光片-FITC通道）或荧光显微镜（FITC滤光片组）分析细胞。
