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Cell Navigator 荧光法脂滴检测分析试剂盒 *红色荧光*

英文名称:Cell Navigator® Fluorimetric Lipid Droplet Assay Kit *Red Fluorescence*
产品参数
Ex (nm)559Em (nm)635
分子量-溶剂-
存储条件在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品货期

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产品优势

低背景干扰:对脂滴具有高特异性,背景噪声极低

应用广泛:兼容荧光显微镜、流式细胞术及荧光酶标检测

 

适用范围

用于检测细胞内脂滴

 

产品介绍

脂滴(Lipid droplets),也称为脂质体(lipid bodies)、油体(oil bodies)或脂肪小体(adiposomes),是一种富含脂质的细胞器,负责调节中性脂质的储存与水解。它们还作为许多重要生物过程的脂质来源储备,例如为能量供应及细胞膜形成与维持提供所需的脂肪酸和胆固醇。细胞质脂滴的异常积聚与多种病理状态相关,可作为代谢缺陷或疾病发生的标志。

AAT Bioquest 的 Cell Navigator® 荧光法脂滴检测试剂盒是一种可靠的工具,能够定量测量脂滴的积聚。该试剂盒采用 Droplite™ Red 作为亲脂性荧光染料,其在脂质富集环境中发出强烈荧光,而在水性介质中荧光信号极弱。该染料适用于活细胞染色,可通过荧光显微镜、流式细胞术或荧光酶标仪高效检测细胞内脂滴。使用 TRITC 滤光片组可观察红色荧光信号。

 

适用仪器


荧光显微镜

Ex: TRITC 滤波片组
Em: TRITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板

荧光酶标仪

 
Ex: 550 nm
Em: 640 nm
Cutoff: 610 nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物准备细胞

2.加入100 µL Droplite™ Red

3.在室温或37°C下孵育10至30分钟

4.在Ex/Em = 550/640 nm(截止波长 = 610 nm)下读取荧光强度,使用带有 TRITC 滤光片的荧光显微镜或带有 FL1 通道的流式细胞仪观察细胞。 

溶液配制

工作溶液配制

通过将5 µL 200X Droplite Red (组分A)稀释到1 mL染色缓冲液(组分B)中来制备Droplite Red 工作溶液。

注意:50 µL的Droplite Red (组分A)可满足一个96孔板。 避光。 Droplite Red 的浓度取决于具体应用。 可以根据特定的细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来改变染色条件。

点击查看细胞制备方案

 

样品示例及操作

贴壁细胞:

1.在96孔黑色壁/透明底板(100 µL /孔/ 96孔)中或在装有适当培养基的培养皿内的盖玻片上生长细胞

2.轻轻吸出培养基,并加入等体积(例如100 µL /孔/ 96孔板)的Droplite Red 染色溶液。

3.将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育10-30分钟。

4.移除Droplite Red 工作溶液(可选)。

5.用酶标仪读取550/640 nm处的荧光,或使用带有TRITC滤光片组的荧光显微镜观察细胞。

悬浮细胞:

1.将细胞以1000 rpm的速度离心5分钟,以得到每管1-5×105个细胞。

2.在500 µL Droplite Red 工作溶液中重悬细胞。

3.在避光条件下,于室温或37°C孵育10至30分钟。

4.离心除去Droplite Red 工作溶液,然后将细胞重悬于500 µL预热的培养基或您选择的缓冲液中,以使每管1-5×105个细胞(可选)。

5.使用带有TRITC滤光片组的荧光显微镜或带有FL1通道的流式细胞仪监测荧光。

注意:由于 Droplite™ Red 在水性介质中荧光信号极弱,染色后无需吸除生长培养基及染料工作液。已染色的细胞可使用 3-4% 甲醛溶液进行固定。此外,该染料也适用于对预先经 3-4% 甲醛固定的细胞进行染色。