Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 绿色荧光,适合微孔板检测
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产品优势
1.通过结合外翻的PS,特异性监测细胞凋亡过程。
2.兼具微孔板、荧光显微镜和流式细胞仪多平台。
适用范围
用于细胞凋亡检测
产品介绍
Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒是一套用于监测细胞活力的专业工具。细胞活力可通过多种参数进行评估,本试剂盒通过检测磷脂酰丝氨酸(PS)外翻现象特异性监测细胞凋亡过程。在凋亡发生时,PS会从细胞膜内侧转移至外侧,其细胞表面暴露可作为凋亡早期/中期的普适性标志物,且该检测信号早于细胞形态学变化出现。
Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒采用小分子荧光探针Apopxin™ PS探针,其与PS的结合亲和力(Kd < 10 nM)显著高于膜联蛋白V。该探针与膜PS结合后呈现绿色荧光,兼具微孔板、荧光显微镜和流式细胞仪多平台兼容优势(常规凋亡检测试剂通常仅适用于单一平台)
适用仪器
荧光酶标仪 | |
Ex: | 490 nm |
Em: | 525 nm |
Cutoff: | 515 nm |
推荐孔板: | 黑色透明底板 |
读取模式: | 底读模式 |
样品实验方案
摘要
1.制备含测试化合物的细胞样本(96孔板:100 µL/孔;384孔板:25 µL/孔)
2.加入等体积的Apopxin™Green工作溶液
3.在室温下孵育1小时
4.使用荧光酶标仪(底部读数模式,Ex/Em = 490/525 nm,截止波长515 nm)或配备FITC滤片的荧光显微镜检测荧光强度
工作液配制
取10 μL 100X Apopxin™ Green(组分A)加入1 mL检测缓冲液(组分B),混匀配制成工作液
注:每孔需100 μL工作液,现配现用
细胞制备指南
详见:https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html
实验操作流程
1.96孔板每孔加入10 µL 或者384孔板每孔加入2.5 µL 10x测试化合物母液(溶于PBS或指定缓冲液),空白对照孔(无细胞培养基)加入等量缓冲液
2.将细胞板置于5% CO₂、37℃培养箱孵育(如:Jurkat细胞用星形孢菌素处理4-6小时)
*注:喜树碱等化合物在405 nm激发时可能因380-490 nm宽发射光谱导致假阳性*
3.在每个孔中添加100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的Apopxin™Green工作溶液。
4.室温避光下孵育细胞板≥1小时。
5.(特别针对悬浮细胞)800 rpm离心2分钟(关闭刹车功能)
6.使用荧光酶标仪(底部读数模式,Ex/Em = 490/525 nm,截止波长515 nm)或配备FITC滤片的荧光显微镜检测荧光强度