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Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光

英文名称:Cell Meter™ Caspase 8 Activity Apoptosis Assay Kit *Green Fluorescence*
产品参数
Ex (nm)500Em (nm)522
分子量-溶剂-
存储条件-
产品概述

产品货期

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产品优势

1.支持高通量筛选平台

2.可定量凋亡细胞中caspase 8活性也可筛选caspase 8抑制剂

 

适用范围

用于监测细胞凋亡

 

产品介绍

Cell Meter™细胞凋亡检测试剂盒是用于监测细胞功能的专业工具。本产品通过检测caspase 8活性来监测细胞凋亡,该蛋白酶由CASP8基因编码,能特异性识别IETD肽段序列,在神经退行性疾病中起重要作用。

试剂盒采用(Ac-IETD)2-R110荧光底物,当caspase 8酶切R110肽段后会产生强荧光信号(激发480-500nm/发射520-530nm),兼容FITC滤光片。提供完整检测试剂和优化方案,适用于高通量筛选,可定量凋亡细胞中caspase 8活性或筛选其抑制剂。

 

适用仪器


荧光酶标仪  
Ex: 490 nm
Em: 525 nm
Cutoff: 515 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
读取模式: 顶/底读模式
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物(100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板)制备细胞
2.加入等体积的Caspase 8工作溶液(100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板)
3.在室温下孵育30分钟至1小时
4.监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光增加(截止= 515 nm)

 

工作溶液配制

将50μLCaspase8底物(组分A)加入10mL测定缓冲液(组分B)中并充分混合以制备Caspase 8工作溶液。 避光。

注意:Caspasae 8工作液不稳定,即配即用。

操作步骤

1.通过将10μL/孔的10X测试化合物(96孔板)或5μL/孔的5X测试化合物(384孔板)加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。对于空白孔(没有细胞的培养基),加入相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在5%CO 2,37℃培养箱中孵育所需的一段时间(用喜树碱或星形孢菌素处理的Jurkat细胞,4-6小时)以诱导细胞凋亡。

3.加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的Caspase 8工作溶液。

4.将板在室温下孵育30分钟至1小时,避光。

注意:如果需要,在室温下加入Caspase 8工作溶液10分钟前,向选定的样品中加入1μL的1 mM Ac-IETD-CHO caspase 8抑制剂,以确认对caspase 8样活性的抑制作用。

5.以800rpm离心细胞板(特别是对于悬浮细胞)2分钟(制动关闭)。

6.用荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 525nm(截止= 515nm)下监测荧光增加。

 

试剂应用文献

Apigenin-induced Apoptosis in Lung Adenocarcinoma A549 Cells: Involvement in IFNA2, TNF, and SPON2 With Different Time Points
Authors: Aida, Rieko and Okano, Kazunori and Nakata, Kyoko and Hagiwara, Hiromi
Journal: Anticancer Research (2025): 2781--2790