Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光
Ex (nm) | 500 | Em (nm) | 522 |
分子量 | - | 溶剂 | - |
存储条件 | - |
产品货期
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产品优势
1.支持高通量筛选平台
2.可定量凋亡细胞中caspase 8活性也可筛选caspase 8抑制剂
适用范围
用于监测细胞凋亡
产品介绍
Cell Meter™细胞凋亡检测试剂盒是用于监测细胞功能的专业工具。本产品通过检测caspase 8活性来监测细胞凋亡,该蛋白酶由CASP8基因编码,能特异性识别IETD肽段序列,在神经退行性疾病中起重要作用。
试剂盒采用(Ac-IETD)2-R110荧光底物,当caspase 8酶切R110肽段后会产生强荧光信号(激发480-500nm/发射520-530nm),兼容FITC滤光片。提供完整检测试剂和优化方案,适用于高通量筛选,可定量凋亡细胞中caspase 8活性或筛选其抑制剂。
适用仪器
荧光酶标仪 | |
Ex: | 490 nm |
Em: | 525 nm |
Cutoff: | 515 nm |
推荐孔板: | 黑色透明底板 |
读取模式: | 顶/底读模式 |
样品实验方案
简要概述
1.用测试化合物(100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板)制备细胞
2.加入等体积的Caspase 8工作溶液(100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板)
3.在室温下孵育30分钟至1小时
4.监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光增加(截止= 515 nm)
工作溶液配制
将50μLCaspase8底物(组分A)加入10mL测定缓冲液(组分B)中并充分混合以制备Caspase 8工作溶液。 避光。
注意:Caspasae 8工作液不稳定,即配即用。
操作步骤
1.通过将10μL/孔的10X测试化合物(96孔板)或5μL/孔的5X测试化合物(384孔板)加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。对于空白孔(没有细胞的培养基),加入相同量的化合物缓冲液。
2.将细胞板在5%CO 2,37℃培养箱中孵育所需的一段时间(用喜树碱或星形孢菌素处理的Jurkat细胞,4-6小时)以诱导细胞凋亡。
3.加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的Caspase 8工作溶液。
4.将板在室温下孵育30分钟至1小时,避光。
注意:如果需要,在室温下加入Caspase 8工作溶液10分钟前,向选定的样品中加入1μL的1 mM Ac-IETD-CHO caspase 8抑制剂,以确认对caspase 8样活性的抑制作用。
5.以800rpm离心细胞板(特别是对于悬浮细胞)2分钟(制动关闭)。
6.用荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 525nm(截止= 515nm)下监测荧光增加。
试剂应用文献
Apigenin-induced Apoptosis in Lung Adenocarcinoma A549 Cells: Involvement in IFNA2, TNF, and SPON2 With Different Time Points
Authors: Aida, Rieko and Okano, Kazunori and Nakata, Kyoko and Hagiwara, Hiromi
Journal: Anticancer Research (2025): 2781--2790