Cell Meter 细胞内谷胱甘肽检测试剂盒(适用于流式细胞仪，激发光：405nm)

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产品优势  

可与7-AAD等其他试剂联用，实现细胞活力和凋亡的多参数研究

适用范围

用于细胞内GSH检测

产品介绍

监测细胞凋亡可采用多种参数指标。本试剂盒通过检测还原型谷胱甘肽（GSH）的减少来测定细胞凋亡。GSH对维持细胞氧化还原水平至关重要，参与自由基清除、药物解毒、细胞信号传导及增殖等多种生理过程。在多数细胞中，GSH浓度的下降是细胞响应不同凋亡刺激而启动死亡程序的早期特征标志。

Cell Meter™细胞内GSH检测试剂盒采用独家ThiolTrace™ Violet 500荧光探针，该探针与硫醇（包括细胞内的GSH）反应后会产生强荧光信号。正常细胞中探针荧光强度高，而凋亡细胞中染色强度显著降低。经ThiolTrace™ Violet染色的细胞可通过流式细胞仪（Pacific Orange滤光片组）进行检测。

Cell Meter™细胞内GSH检测试剂盒可与7-AAD（货号#17501）等试剂联用，实现细胞活力与凋亡的多参数分析，并已优化适用于流式细胞仪筛选凋亡激活剂和抑制剂。

适用仪器

实验方案

简要概述

用5×10⁵到1×10⁶细胞/ mL 的密度制备含测试化合物的细胞

准备ThiolTrace Violet 500工作溶液并将其添加到细胞中

在37℃孵育20至30分钟

在Ex / Em = 405/525 nm处读取荧光强度（Pacific Orange滤光片组）

溶液配制

储备溶液配制

ThiolTrace Violet 500储备液（500X）：
在ThiolTrace Violet 500 的小瓶中加入200 µL DMSO（组分C）。

注意：分装并在-20℃储存未使用的ThiolTrace Violet 500，避免反复冻融。

工作溶液配制

ThiolTrace Violet 500工作溶液（1X）：
将2 µL ThiolTrace Violet 500储备溶液添加到1 mL的测定缓冲液（组分B）或您自备的缓冲液中，并充分混合。

注意：ThiolTrace Violet 500 工作溶液可以在含有血清的细胞培养基中制备。

操作步骤

1.对于贴壁细胞，用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整，在使用ThiolTrace Violet 500工作溶液孵育之前，用含血清的培养基洗涤细胞一次。

注意：孵育时间取决于所用的细胞类型和细胞浓度。

2.将细胞以1000 rpm的速度离心4分钟，然后用1 mL缓冲液（可选）洗涤细胞。

3.将细胞重悬于1 mL ThiolTrace Violet 500工作溶液中，并在37℃的培养箱中孵育20至30分钟。

4.使用Pacific Orange滤光片组（Ex / Em = 405/525 nm），用流式细胞仪检测荧光强度。