Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 橙色荧光 适合流式细胞检测
| Ex (nm) | 557 | Em (nm) | 570 |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
产品货期
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产品优势
高灵敏度与特异性：通过结合外翻的PS，高效检测早期凋亡细胞。
非放射性检测：提供安全、简便的凋亡检测方法，无需放射性物质。
适用范围
用于细胞凋亡检测
产品介绍
Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒是一套专业的细胞活力监测工具。细胞活性可通过多种参数进行评估，本试剂盒专门通过检测磷脂酰丝氨酸（PS）外翻现象来监测细胞凋亡过程。
在细胞凋亡过程中，磷脂酰丝氨酸会从细胞膜内侧翻转至外侧。这种细胞表面PS的暴露是凋亡早期/中期的普遍标志，其可检测时间早于细胞形态学变化的发生。本试剂盒采用特异性结合PS的荧光标记膜联蛋白V（Annexin V），该偶联物已被证实能选择性结合PS。
Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒过优化，适用于配备 575/26 nm 发射滤光片组（PE 通道）的流式细胞仪监测细胞凋亡。
适用仪器
| 流式细胞仪 | |
| Ex: | 488 nm or 532 nm |
| Em： | 575/26 nm |
| 通道: | PE 通道 |
样品实验方案
简要概述
1.制备含测试化合物的细胞样本（200 µL/样本）
2.加入Annexin V-iFluor® 555检测溶液
3.室温孵育30-60分钟
4.使用配备575/26 nm滤光片（PE通道）的流式细胞仪或Cy3滤光组的荧光显微镜分析
细胞制备指南
详细制备方法请访问：
https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html
实验操作流程
Annexin V-iFluor® 555细胞孵育
1.使用测试化合物处理细胞诱导凋亡（如：Jurkat细胞用星形孢菌素处理4-6小时）
2.离心收集细胞（1-5×10⁵细胞/管）
3.用200 µL检测缓冲液（组分B）重悬
4.加入2 µL Annexin V-iFluor® 555（组分A）
5.室温避光孵育30-60分钟
6.加入300 µL检测缓冲液（组分B）以增加样本体积，便于后续流式细胞仪或荧光显微镜分析。
7.流式细胞术：使用配备575/26 nm滤光片（PE通道）的流式细胞仪监测荧光强度
荧光显微术：采用Cy3滤光组进行荧光显微镜观察
流式细胞术检测
使用575/26 nm滤光片（PE通道）定量Annexin V-iFluor® 555结合情况
注：贴壁细胞因收获过程可能损伤膜结构，常规不建议流式检测。但Casiola-Rosen等学者已建立相关方法
荧光显微镜检测
1.孵育后吸取细胞悬液，用检测缓冲液洗涤1-2次
2.将细胞滴加至盖玻片
注意事项：对于贴壁细胞，建议直接在盖玻片上进行培养。完成Annexin V-iFluor® 555孵育后，需使用检测缓冲液洗涤1-2次，随后重新加入检测缓冲液覆盖盖玻片。将盖玻片倒扣于载玻片上即可观察细胞。此外，Annexin V-iFluor® 555标记后的细胞也可采用2%甲醛固定，固定后仍可通过显微镜进行观察。
3.使用荧光显微镜Cy3滤光片组检测Annexin V-iFluor® 555标记的凋亡细胞。当加入Nuclear Red™ DCS1（AAT货号#17552）后，可通过Cy5通道评估细胞活力。细胞膜表面的橙色荧光标记表明Annexin V-iFluor® 555与磷脂酰丝氨酸（PS）的特异性结合。
