Cell Meter FITC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪

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产品优势

高灵敏度与特异性：通过结合外翻的PS，高效检测早期凋亡细胞。

非放射性检测：提供安全、简便的凋亡检测方法，无需放射性物质。

适用范围

用于细胞凋亡检测

产品介绍

Cell Meter  FITC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒专为通过检测磷脂酰丝氨酸（PS）外翻现象来监测细胞凋亡而设计。在细胞凋亡过程中，磷脂酰丝氨酸会从细胞膜内侧翻转至外侧。细胞表面出现磷脂酰丝氨酸是凋亡早期/中期的普遍标志，这一现象可在细胞形态学变化显现前被检测到。

Cell Meter  FITC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒采用可特异性结合磷脂酰丝氨酸（PS）的FITC标记膜联蛋白V（FITC-Annexin V）荧光偶联物。经实验验证，该FITC-Annexin V偶联物能选择性结合PS。本检测体系经过优化，适用于配备488 nm激发激光和530/30 nm发射滤光片（FITC通道）的流式细胞仪进行细胞凋亡监测。

样品实验方案

简要概述

1.制备含测试化合物的细胞样本（200 µL/样本）

2.加入 FITC-Annexin V检测溶液

3.室温孵育30-60分钟

4.使用配备 FL1通道(Ex/Em = 490/525 nm）的流式细胞仪分析细胞。

储备液的制备

除非另有说明，所有未用完的库存溶液应在制备后分成单次使用的分装，并储存在-20 °C。避免反复冻融

1. FITC-Annexin V 储备液 (100X):

向RPE-膜联蛋白V（组分A）瓶中加入200 µL含0.2% BSA的PBS缓冲液，配制100X FITC-膜联蛋白V储存液。

注：重新配制的100X FITC-膜联蛋白V储存液需保存于4°C，请勿冷冻。

细胞制备指南

详细制备方法请访问：
https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html

实验操作流程

1.使用测试化合物处理细胞诱导凋亡（如：Jurkat细胞用星形孢菌素处理4-6小时）

注意： 由于在细胞脱离或收获过程中可能会发生特定的膜损伤，因此不常对贴壁细胞进行 Annexin V 流式细胞术分析。然而，Casiola-Rosen 等人和 van Engelend 等人之前已经报道了在贴壁细胞类型上使用 Annexin V 进行流式细胞术的方法。

2.离心收集细胞（1-5×10⁵细胞/管）

3.用200 µL检测缓冲液（组分B）重悬

4.加入2 µL的 100X FITC-Annexin V储备液

可选： 对于坏死细胞，添加2 µL的100X 碘化丙啶（组分C）。

5.室温避光孵育20-60分钟

可选：加入300 µL检测缓冲液（组分B）以增加样本体积。

6.使用FL1通道(Ex/Em = 490/525 nm）的流式细胞仪监测FITC-Annexin V的荧光强度；当向细胞中加入碘化丙啶时，使用FL2通道测量细胞活力。