Cell Navigator 活细胞微管蛋白染色试剂盒

样品实验方案

简要概述

1.制备待测细胞悬液（密度5×10⁵至1×10⁶个细胞/mL）

2.配制并加入Tubulite Deep™ Red工作液

3.37℃下孵育30至60分钟

4.使用Cy5滤波片检测荧光强度

重要提示：实验前需将所有试剂组分室温解冻
本方案仅提供通用指导，需根据具体实验优化
Tubulite™ Deep Red不适用于甲醛固定细胞（染色后固定会破坏微管结构）

细胞制备指南 https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的所有储备液需分装后-20℃保存，避免反复冻融
Tubulite Red储备液（500X）：

向组分A（Tubulite™ Deep Red）中加入25μL DMSO（组分D），充分混匀。

 注意：未使用的Tubulite Red储备液分装保存于-20℃，避免反复冻融

2.工作溶液配制

Tubulite Red工作溶液（1X）：

取2.5μL母液加入1mL检测缓冲液（组分B）加入100μL 25mM ReadiUse™丙磺舒（组分D），充分混匀。

注：建议现配现用，工作液可稳定数小时

样品示例及操作流程

1.根据需要准备细胞样品。

2.可选：除去细胞生长培养基，并用PBS（未提供）或您选择的任何其他缓冲液洗涤细胞。

3.加入100 µL Tubulite Red工作溶液，37℃孵育30至60分钟。

注意：需根据细胞类型调整合适的孵育时间

4.除去工作溶液，用含2.5 mM丙磺舒（从组分C稀释而来）的PBS或您选择的任何其他缓冲液洗涤细胞2次。

5.向细胞样本中加入含2.5 mM丙磺舒（由组分C稀释配制）的检测缓冲液覆盖细胞层，使用Cy5滤光片在荧光显微镜下检测荧光强度。

试剂应用文献