CytoFix 溶酶体红色探针
Ex (nm) | 565 | Em (nm) | 585 |
分子量 | 863.75 | 溶剂 | DMSO |
存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品货期
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产品优势
1.高效染色性能
2.固定后长效保留
3.操作流程便捷
适用范围
用于标记活细胞
产品介绍
溶酶体是细胞内含有酸性水解酶的细胞器,能够通过自噬作用分解废物和细胞残骸。AAT Bioquest公司开发的CytoFix™ Red溶酶体荧光染料可特异性标记溶酶体,该染料不仅能有效穿透活细胞膜并富集于溶酶体内,而且在细胞固定后仍能长期保留——其产生的荧光信号可在溶酶体内稳定维持至少1周,是理想的溶酶体示踪剂。该染料具有染色效率高、固定后保留时间长、操作简便等特点,不仅适用于悬浮细胞和贴壁细胞,还能与GFP表达细胞或其他细胞器染料配合使用进行多色分析,并可兼容各类荧光检测平台。
适用仪器
荧光显微镜 | |
激发: | Cy3/TRITC滤波片 |
发射: | Cy3/TRITC滤波片 |
推荐孔板: | 黑色透明 |
滤波片: | Cy3/TRITC滤波片组 |
样品实验方案
简要概述
- 在生长培养基中准备细胞
- 除去生长培养基
- 将细胞与CytoFix LysoRed工作溶液在37°C下孵育20-30分钟
- 去除CytoFix LysoRed工作溶液
- 使用Cy3 / TRITC滤光片组在荧光显微镜下分析
溶液配制
工作溶液配制
CytoFix LysoRed工作溶液:将20 µL储备溶液添加到10 mLHanks缓冲液和20 mM Hepes缓冲液(HHBS)或自备缓冲液中,并充分混合。
注意:20 µL储备液足以进行一次96孔板分析。 可以根据特定的细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来改变染色条件。
注意 未使用的CytoFix LysoRed储备溶液可以分装,并在≤-20°C下以较小的等分试样存储。 避光并避免重复的冻融循环。
实验步骤
1.在生长培养基中准备细胞。
2.去除细胞培养基并洗涤两次(可选)
3.在细胞培养板中加入100 µL /孔(96孔板)或50 µL /孔(384孔板)的CytoFix LysoRed工作溶液
(注意细胞膜探针的佳浓度因具体应用而异。)
4.避光保存,在37°C下孵育细胞20-30分钟。
5.除去每个孔中的工作溶液。 用HHBS或您自备缓冲液洗涤细胞一次(可选)。
6.可选:在室温下用4%甲醛将细胞固定20分钟。 洗涤细胞两次以除去任何固定液。
7.使用带有Cy3 / TRITC滤光片组的荧光显微镜观察细胞中的荧光信号。