iFluor 488小麦胚芽凝集素(WGA)缀合物

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规格1 mg价格1176
Ex (nm)491Em (nm)516
分子量N/A溶剂Water
产品详细介绍


简要概述

麦胚凝集素(WGA)是一种与N-乙酰-D-葡萄糖胺和唾液酸结合的凝集素。它是目前研究最多、应用最广泛的一类凝集素。WGA与糖缀合物结合,其衍生物和缀合物被广泛用于标记细胞膜和纤维化瘢痕组织,用于荧光成像和分析。WGA的糖结合特异性与β-1,4-GlcNAc-连接残基的序列,即几丁质酶有关。每个单体包含两个相同的非相互作用的结合位点,它们与3或4β-1,4-GlcNAc单元互补。在所检测的单糖中,只有GlcNAc与WGA结合。甘露聚糖不结合,而GalNAc只能弱结合。WGA与含有Galβ(1--4)GlcNAcβ(1--3)重复序列(即聚乳糖胺型聚糖)的大寡糖中的内部GlcNAc残基具有高亲和力结合。N-乙酰神经氨酸只参与与WGA的低亲和力相互作用。WGA表现出了丰富的糖类特异性结合模式,可用于复杂碳水化合物的结构分析。iFluor 488小麦胚芽凝集素(WGA)缀合物是绿色荧光中最亮的WGA缀合物。iFluor 488小麦胚芽凝集素(WGA)缀合物与唾液酸和N-乙酰氨基葡萄糖残基结合,如AF488 WGA结合物那样。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的iFluor 488小麦胚芽凝集素(WGA)缀合物。

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适用仪器


荧光显微镜  
激发: FITC滤波片
发射: FITC滤波片
推荐孔板: 黑色透明
 


产品说明书

样品分析方案

溶液配制

储备溶液配制 

iFluor 488 小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物储备液 (200X)

将 500 µL ddH2O 添加到粉末小瓶中,制成 2 mg/mL 的储备溶液。 注意:重新配制的缀合物溶液可在 2-8 °C 下短期储存,或在 -20 °C 下长期储存。

工作溶液配制 

iFluor 488-小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物​​工作溶液 (1X)

将 5 μL 200X WGA 储备溶液添加到 1 mL HHBS 缓冲液中。
注意:不同细胞系的优化染色浓度可能不同。 活细胞的推荐起始浓度为 5-10 µg/mL。

 

操作步骤

1.活细胞染色
1.1 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
1.2 添加 100 µL iFluor 488-WGA 工作溶液。
1.3 将细胞与 WGA 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 分钟。
1.4 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
1.5 使用 FITC 滤光片组在荧光显微镜上成像细胞。

 

2.固定细胞染色
2.1 在PBS中使用4%的甲醛固定细胞。
注意:对于固定细胞膜染色,建议在没有透化步骤的情况下进行染色。固定后透化步骤会导致细胞内区室染色,如高尔基体和内质网 (ER) 结构染色。
2.2 添加 100 µL iFluor 488-WGA 工作溶液。
2.3 在室温下用 WGA 工作溶液孵育细胞 10-30 分钟。
2.4 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
2.5 使用 FITC 滤光片组在荧光显微镜上成像细胞。

 

图示

图 1. 使用 iFluor 488-小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物​​以 5 µg/mL的浓度在活细胞(Hela细胞) 染色 30 分钟,然后用 Hoechst 33342(Cat# 17535)染色。最后使用带FITC和DAPI滤波片组的荧光显微镜成像。

 

参考文献

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说明书
iFluor 488小麦胚芽凝集素(WGA)缀合物.pdf