Amplite 荧光法谷胱甘肽检测试剂盒 绿色荧光

货号10055存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格200 Tests价格2544
Ex (nm)510Em (nm)524
分子量溶剂
产品详细介绍


简要概述

Amplite 荧光法谷氨酸检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测谷氨酸的试剂盒,物系统中半胱氨酸的试剂和试剂盒很少,并且在为数不多的商业化半胱氨酸检测试剂盒中存在灵敏度较低、操作较冗长等缺点。Amplite荧光法谷胱甘肽分析试剂盒 *绿色荧光*对样品中谷胱甘肽提供超敏感实验用于定量。这个试剂盒利用专有的无荧光染料通过与硫醇反应产生强荧光。本试剂盒提供敏感的一步荧光方法,并且在100 ul检测体积中能检测到1pmol的半胱氨酸或者谷胱甘肽。本试剂盒可以用于96或384微孔板分析,并且无需任何分步骤,就可以轻易地实现自动化。它的信号可以通过酶标仪在490/520nm处轻易地读取。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法谷胱甘肽检测试剂盒。 

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 525nm
Cutoff: 515nm
推荐孔板: 黑色底板


产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备GSH工作溶液(50μL)
2.添加GSH标准品或测试样品(50μL)
3.在室温下孵育10至60分钟
4.检测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光增加(cut off= 515 nm)

 

溶液制备

1.储备溶液

1.1 GSH标准溶液(1 mM):
将200μL测定缓冲液(组分B)加入到GSH标准品(组分C)的小瓶中以制备1mM(1nmol /μL)GSH标准溶液。

1.2 Thiolite Green原液(100X):
将100μLDMSO(组分D)加入到Thiolite Green(组分A)的小瓶中以制备100X Thiolite Green原液。

 

2.标准溶液

2.1醛标准溶液

将30μL的1mM(1nmol /μL)GSH标准溶液加入到970μL的测定缓冲液(组分B)中以产生30μM(30pmol /μL)GSH标准溶液。 取30μM(30 pmol /μL)GSH标准溶液,进行1:3连续稀释,得到用分析缓冲液(组分B)连续稀释的GSH标准品(SD7-SD1)。 注意:稀释的GSH标准溶液不稳定。 在4小时内使用。

 

3.工作溶液

将50μL 100XThiolite Green原液加入5 mL分析缓冲液(组分B)中,充分混合,制成GSH工作溶液。

点击查看细胞样品制备指南

 

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中GSH标准品和测试样品的布局。 SD = GSH标准品(SD1  -  SD7,0.01至10μM); BL =空白对照; TS =测试样品

BL BL TS TS
SD1 SD1 ... ...
SD2 SD2 ... ...
SD3 SD3    
SD4 SD4    
SD5 SD5    
SD6 SD6    
SD7 SD7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
SD1-SD7 50ul 连续稀释液(0.01至10μM)
BL 50ul 分析缓冲液
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备GSH标准品(SD),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。 注意:根据需要处理细胞或组织样本。

2.在GSH标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLGSH工作溶液,使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μLGSH工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应10至60分钟,避光。

4.用荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 525nm(截止= 515nm)下检测荧光增加。

 

参考文献

Comparison of different methods to study effects of silver nanoparticles on the pro-and antioxidant status of human keratinocytes and fibroblasts
Authors: Sebastian Ahlberg, Fiorenza Rancan, Matthias Epple, Kateryna Loza, David Höppe, Jürgen Lademann, Annika Vogt, Burkhard Kleuser, Christian Gerecke, Martina C Meinke
Journal: Methods (2016)

 

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说明书
Amplite 荧光法谷胱甘肽检测试剂盒 绿色荧光 .pdf