Amplite 荧光法羊抗鼠IgG-HRP偶联物ELISA检测试剂盒 红色荧光

货号11540存储条件f/l
规格1000 Tests价格2460
Ex (nm)571Em (nm)584
分子量溶剂
产品详细介绍


简要概述

        Amplite 荧光法羊抗鼠IgG-HRP偶联物ELISA检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于ELISA检测的试剂盒,过氧化氢是一种活性氧代谢副产物,可作为许多氧化应激相关状态的关键调节剂。 它涉及许多与哮喘,动脉粥样硬化,糖尿病血管病变,骨质疏松症,许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物学事件。 这种活性物质的测量有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒使用我们独特的OxiVision Blue过氧化物传感器来定量活细胞中的过氧化氢。 OxiVision 蓝色过氧化物传感器具有细胞渗透性,当与过氧化氢反应时会产生蓝色荧光。 该试剂盒提供了一种监测活细胞中过氧化氢水平的灵敏工具,并且它被优化用于荧光显微镜。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法羊抗鼠IgG-HRP偶联物ELISA检测试剂盒。 

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备ELISA板
2.准备过氧化物酶工作溶液
3.将100μL/孔的过氧化物酶工作溶液加入ELISA板中
4.在室温下孵育15-60分钟
5.监测Ex / Em = 540 / 590nm处的荧光强度

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1Amplite 红色过氧化物酶底物储备液(200X):
将250μLDMSO(组分D)加入到Amplite 红色过氧化物酶底物(组分A)的小瓶中。 注意:50μL的Amplite 红色过氧化物酶底物原液足以用于1个平板。

1.2 H2O2储备溶液(20 mM):
将22.7μL的3%H2O2(0.88M,组分B)加入977μL的测定缓冲液(组分C)中。 注意:稀释的H2O2储备溶液不稳定,应丢弃未使用的部分。

 

2.标准溶液

小鼠IgG标准
小鼠IgG(未包括)可用于产生标准曲线。 使用初始浓度3μg/ mL和1:3稀释因子,将0.2M碳酸氢钠缓冲液(pH9.4)的总小鼠IgG稀释到微量培养板中。

 

3.工作溶液

3.1 山羊抗小鼠IgG-HRP结合物工作液:
将2μL山羊抗小鼠IgG-HRP缀合物(组分E)加入10mL含1%BSA的PBS(PBS-BSA,不包括在内)中。 注意:10 mL山羊抗小鼠IgG-HRP结合物工作溶液足以用于1个平板。 推荐该山羊抗小鼠IgG-HRP缀合物工作溶液的浓度作为初始浓度。应根据经验确定每种特定应用的最佳浓度。

3.2 过氧化物酶工作溶液:
将50μL的Amplite 红色过氧化物酶底物储备溶液(200X)和100μL的H2O2储备溶液(20mM)加入9.85mL的测定缓冲液(组分C)中以制备总体积为10mL的过氧化物酶工作溶液,避光。

 

样品分析

1.准备ELISA板:

1.1执行所有必要的ELISA准备步骤。

1.2用含有0.02%至0.05%Tween 20(PBS-Tween)和排液的PBS洗涤ELISA孔三次。

1.3向每个孔中加入100μL制备的山羊抗小鼠IgG-HRP缀合物工作溶液。

1.4在室温下孵育30分钟。 排出HRP结合物。

1.5用PBS-Tween洗涤孔三次并排干。

2.在ELISA板中运行过氧化物酶测定:

2.1在含有样品和对照的每个排出的微孔板中加入100μL过氧化物酶工作溶液。

2.2在室温下孵育反应30分钟或更长时间,避光。

2.3用激发530-570nm(最佳540nm)和发射590-600nm的荧光板读数器监测荧光增加。 注意:也可以用吸光度酶标仪在576±5 nm的波长下读板。 然而,与荧光读数相比,吸收检测具有更低的灵敏度。

 

参考文献

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