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Amplite 荧光法L-乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒

英文名称:Amplite® Fluorimetric L-Lactate Dehydrogenase (LDH) Assay Kit
产品参数
Ex (nm)-Em (nm)-
分子量-溶剂-
存储条件-
产品概述

Amplite 荧光法L-乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测乳酸的试剂盒,乳酸脱氢酶(LDH )是一种可催化丙酮酸和乳酸的相互转换氧化还原酶。 LDH存在于各种各样的生物体,包括动物和植物的细胞质中。细胞组织的损伤或红细胞溶血后释放的LDH进入血液。因为LDH是相当稳定的酶,它已被广泛地用于评价和组织细胞毒性的存在。乳酸脱氢酶的定量具有广阔的应用范围。 LDH可在某些病理条件下提高,如癌症。这种Amplite 乳酸脱氢酶测定试剂盒提供了用于生物样品中L-乳酸脱氢酶( L- LDH)基于荧光检测的方法,如血清,血浆,尿液,以及细胞培养物的样品。荧光信号可以通过荧光酶标仪在激发/发射= 540 nm/590 nm处读出。有了这个荧光Amplite L-乳酸脱氢酶测定试剂盒,我们能够探测到小至1 mU/mL的L-乳酸脱氢酶在100 μL的反应体积。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 荧光法L-乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒。 

 

适用仪器


荧光酶标仪  
Ex: 540nm
Em: 590nm
Cutoff: 570nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
   
光吸收酶标仪  
吸收: 575/605nm
推荐孔板: 纯白色孔板
实验方案

96孔板测定示例

概述

制备D-乳酸测定混合物(50μL)

加入D-乳酸标准品或测试样品(50μL)

在室温下孵育30分钟~2小时

监测吸光度比率在A575nm / A605nm处增加

注意:在开始实验之前,在室温下解冻每个试剂盒组分的一个小瓶。

 

操作方法

1.准备NAD储备溶液(100X):

向NAD小瓶(组分C)中加入100μLH2O,制成100X NAD储备溶液。

 

2.准备D-乳酸储备液:

将200μLH2 O或1×PBS缓冲液加入到D-乳酸盐标准品(组分D)的小瓶中以制备100mM D-乳酸盐标准溶液。

注意:未使用的D-lacate标准储备溶液应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

 

3.准备D-乳酸标准品(0至1 mM)的连续稀释液:

3.1将10μLD-乳酸储备溶液(来自步骤2)加入990L 1x PBS缓冲液中以产生1mM D-乳酸盐标准溶液。

注意:稀释的D-乳酸标准溶液不稳定,应在4小时内使用。

3.2取200μL的1mM D-乳酸标准溶液进行1:3连续稀释,得到300,100,30,10,3,1和0μM的D-乳酸标准品系列稀释液。

3.3如说明书中的表1和2中所述,将含有D-乳酸盐标准品和含D-乳酸盐的测试样品的系列稀释液加入白色透明底96孔微量培养板中。

 

4.准备D-乳酸测定混合物:

4.1将5 mL测定缓冲液(组分B)加入一瓶酶混合物(组分A)中。

4.2将50μLNAD储备液(100X,来自步骤1)加入组分A(来自步骤4.1)的瓶中,并且混合均匀。

注意:这种D-乳酸测定混合物足以用于一个96孔板。 未使用的D-乳酸测定混合物应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

 

5.运行D-乳酸测定:

5.1将50μLD-乳酸测定混合物(来自步骤4.2)添加到D-乳酸标准品,空白对照和测试样品(参见步骤3.3)的每个孔中,以使总D-乳酸测定体积为100μL/孔。

注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μLD-乳酸测定混合物。

5.2在室温下孵育反应30分钟至2小时,避光。

5.3用A575nm / A605nm的吸光度读板仪检测吸光度比率的增加。

 

参考文献

Dendrobium huoshanense polysaccharide regionally regulates intestinal mucosal barriers function and intestinal microbiota in mice
Authors: Song-Zi Xie, Bing Liu, Hui-Yu Ye, Qiang-Ming Li, Li-Hua Pan, Xue-Qiang Zha, Jian Liu, Jun Duan, Jian-Ping Luo
Journal: Carbohydrate Polymers (2018)

Exploring the Probiotic and Compound Feed Fermentative Applications of Lactobacillus plantarum SK1305 Isolated from Korean Green Chili Pickled Pepper
Authors: Kai-Min Niu, Damini Kothari, Sang-Buem Cho, Sung-Gu Han, In-Geun Song, Sam-Churl Kim, Soo-Ki Kim
Journal: Probiotics and Antimicrobial Proteins (2018): 1--12

Arenobufagin inhibits prostate cancer epithelial-mesenchymal transition and metastasis by down-regulating β-catenin
Authors: Liping Chen, Weiqian Mai, Minfeng Chen, Jianyang Hu, Zhenjian Zhuo, Xueping Lei, Lijuan Deng, Junshan Liu, Nan Yao, Maohua Huang
Journal: Pharmacological Research (2017)

Fibroblast Activation Protein Alpha-Activated Tripeptide Bufadienolide Anti-tumor Prodrug with Reduced Cardiotoxicity
Authors: Li-Juan Deng, Long-Hai Wang, Cheng-Kang Peng, Yi-Bin Li, Mao-Hua Huang, Min-Feng Chen, Xue-Ping Lei, Ming Qi, Yun Cen, Wen-Cai Ye
Journal: Journal of Medicinal Chemistry (2017)

Neuronal Culture Microenvironments Determine Preferences in Bioenergetic Pathway Use
Authors: Juliane Sünwoldt, Bert Bosche, Andreas Meisel, Philipp Mergenthaler
Journal: Frontiers in Molecular Neuroscience (2017): 305

The use of KnockOut serum replacement (KSR) in three dimentional rat testicular cells co-culture model: An improved male reproductive toxicity testing system
Authors: Xiaofang Zhang, Lei Wang, Xiaodong Zhang, Lijun Ren, Wenjing Shi, Yijun Tian, Jiangbo Zhu, Tianbao Zhang
Journal: Food and Chemical Toxicology (2017)

High glucose and interleukin 1β-induced apoptosis in human umbilical vein endothelial cells involves in down-regulation of monocarboxylate transporter 4
Authors: Dong Wang, Qingjie Wang, Gaoliang Yan, Yong Qiao, Ling Sun, Boqian Zhu, Chengchun Tang, Yuchun Gu
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2015): 607--614

Intracellular ATP decrease mediates NLRP3 inflammasome activation upon nigericin and crystal stimulation
Authors: Johji Nomura, Alexander So, Mizuho Tamura, Nathalie Busso
Journal: The Journal of Immunology (2015): 5718--5724

 

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