Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 绿色荧光 适合流式细胞检测
Ex (nm) | 491 | Em (nm) | 516 |
分子量 | - | 溶剂 | - |
存储条件 | - |
产品货期
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产品优势
高灵敏度与特异性:通过结合外翻的PS,高效检测早期凋亡细胞。
非放射性检测:提供安全、简便的凋亡检测方法,无需放射性物质。
适用范围
用于细胞凋亡检测
产品介绍
Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒是一套专业的细胞活性监测工具。细胞活性可通过多种参数进行评估,本试剂盒专门通过检测磷脂酰丝氨酸(PS)外翻现象来监测细胞凋亡过程。
在细胞凋亡过程中,磷脂酰丝氨酸会从细胞膜内侧翻转至外侧。这种细胞表面PS的暴露是凋亡早期/中期的普遍标志,其可检测时间早于细胞形态学变化的发生。本试剂盒采用特异性结合PS的荧光标记膜联蛋白V(Annexin V),该偶联物已被证实能选择性结合PS。
Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒过优化,适用于配备FITC通道(绿色荧光)的流式细胞仪进行细胞凋亡监测。
适用仪器
流式细胞仪 | |
Ex: | 488 nm |
Em: | 530/30 nm |
通道: | FITC 通道 |
标准操作流程
简要概述
1.制备含测试化合物的细胞样本(200 µL/样本)
2.加入Annexin V-iFluor® 488原液
3.室温避光孵育30-60分钟
4.使用配备530/30 nm滤光片(FITC通道)的流式细胞仪分析
重要提示
实验前请将100X碘化丙啶(组分C)于室温解冻
细胞制备指南
详细细胞样本制备方法请参阅:
https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html
标准实验方案
1.使用测试化合物处理细胞诱导凋亡(如:Jurkat细胞用喜树碱处理4-6小时)
注:贴壁细胞因收获过程可能造成膜损伤,常规不推荐用于流式检测。但Casiola-Rosen和van Engelend等已建立相关方法(参见文献)
2.离心收集细胞(1-5×10⁵细胞/管)
3.用200 µL检测缓冲液(组分B)重悬
4.加入2 µL Annexin V-iFluor® 488(组分A)
(可选)加入2 µL 100X碘化丙啶(组分C)标记坏死细胞
5.室温避光孵育30-60分钟
(可选)补加200-300 µL检测缓冲液(组分B)后上机
6.监测Annexin V-iFluor® 488荧光强度:使用FL1通道的流式细胞仪530/30 nm滤光片(FITC通道)
监测细胞活性(加碘化丙啶后):使用FL2通道的流式细胞仪610/20 nm滤光片(PE-Texas Red通道)