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Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 绿色荧光 适合流式细胞检测

英文名称:Cell Meter™ Annexin V Binding Apoptosis Assay Kit *Green Fluorescence Optimized for Flow Cytometry*
产品参数
Ex (nm)491Em (nm)516
分子量-溶剂-
存储条件-
产品概述

产品货期

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产品优势

高灵敏度与特异性:通过结合外翻的PS,高效检测早期凋亡细胞。

非放射性检测:提供安全、简便的凋亡检测方法,无需放射性物质。

 

适用范围

用于细胞凋亡检测

 

产品介绍

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒是一套专业的细胞活性监测工具。细胞活性可通过多种参数进行评估,本试剂盒专门通过检测磷脂酰丝氨酸(PS)外翻现象来监测细胞凋亡过程。

在细胞凋亡过程中,磷脂酰丝氨酸会从细胞膜内侧翻转至外侧。这种细胞表面PS的暴露是凋亡早期/中期的普遍标志,其可检测时间早于细胞形态学变化的发生。本试剂盒采用特异性结合PS的荧光标记膜联蛋白V(Annexin V),该偶联物已被证实能选择性结合PS。

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒过优化,适用于配备FITC通道(绿色荧光)的流式细胞仪进行细胞凋亡监测。

 

适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 488 nm
Em: 530/30 nm 
通道: FITC 通道
实验方案

标准操作流程

简要概述

1.制备含测试化合物的细胞样本(200 µL/样本)

2.加入Annexin V-iFluor® 488原液

3.室温避光孵育30-60分钟

4.使用配备530/30 nm滤光片(FITC通道)的流式细胞仪分析

重要提示
实验前请将100X碘化丙啶(组分C)于室温解冻

 

细胞制备指南

详细细胞样本制备方法请参阅:
https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html

 

标准实验方案

1.使用测试化合物处理细胞诱导凋亡(如:Jurkat细胞用喜树碱处理4-6小时)

注:贴壁细胞因收获过程可能造成膜损伤,常规不推荐用于流式检测。但Casiola-Rosen和van Engelend等已建立相关方法(参见文献)

2.离心收集细胞(1-5×10⁵细胞/管)

3.用200 µL检测缓冲液(组分B)重悬

4.加入2 µL Annexin V-iFluor® 488(组分A)

(可选)加入2 µL 100X碘化丙啶(组分C)标记坏死细胞

5.室温避光孵育30-60分钟

(可选)补加200-300 µL检测缓冲液(组分B)后上机

6.监测Annexin V-iFluor® 488荧光强度:使用FL1通道的流式细胞仪530/30 nm滤光片(FITC通道)

监测细胞活性(加碘化丙啶后):使用FL2通道的流式细胞仪610/20 nm滤光片(PE-Texas Red通道)