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Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 绿色荧光 适合流式细胞检测

英文名称:Cell Meter™ Annexin V Binding Apoptosis Assay Kit *Green Fluorescence Optimized for Flow Cytometry*
产品参数
Ex (nm)491Em (nm)516
分子量-溶剂-
存储条件-
产品概述

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的细胞凋亡检测试剂盒,我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。有多种参数可用于检测细胞活力。该特定试剂盒旨在通过测量磷脂酰丝氨酸(PS)的转运来监测细胞凋亡。在凋亡中,PS转移到质膜的外部小叶。磷脂酰丝氨酸在细胞表面的出现是细胞凋亡初始/中间阶段的普遍指标,可以在观察到形态变化之前进行检测。该试剂盒使用与PS特异性结合的荧光膜联蛋白V。已经证明膜联蛋白V缀合物选择性结合PS,使用带有FITC通道的流式细胞仪(绿色荧光)优化了此特定的检测试剂盒,以检测细胞凋亡。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒。

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适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 488 nm
Em: 530/30 nm 
通道: FITC 通道
实验方案

样品实验方案

简要概述

用测试化合物(200μL/样品)制备细胞
添加Annexin V-iFluor 488原液
在室温下孵育30-60分钟
使用FL1通道的流式细胞仪分析细胞(Ex / Em = 490/525 nm)

 

操作步骤

1.用测试化合物处理细胞一段时间(用喜树碱处理的Jurkat细胞4-6小时)以诱导细胞凋亡。注意:膜粘附细胞的膜联蛋白V流式细胞术分析未经常检测,因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。然而,Casiola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。和van Engelend等人。

2.离心细胞,得到1-5×105个细胞/管。

3.将细胞重悬于200μL测定缓冲液(组分B)中。

4.将2μL膜联蛋白V-iFluor 488(组分A)加入细胞中。

5.可选:加入2μL100X碘化丙啶(成分C)用于坏死细胞。

6.在室温下孵育30至60分钟,避光。

7.可选:在使用流式细胞仪分析细胞之前,添加200至300μL的测定缓冲液(组分B)以增加体积。

8.使用具有FL1通道的流式细胞仪(Ex / Em = 490 / 525nm)监测膜联蛋白V-iFluor 488的荧光强度。当碘化丙啶加入细胞时,使用FL2通道测量细胞活力。

 

数据分析

        在活的非凋亡细胞中,膜联蛋白V-iFluor 488检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡,其通常为所有细胞的2-6%。 在凋亡细胞中,膜联蛋白V-iFluor 488与磷脂酰丝氨酸结合,磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外部小叶上,因此导致染色强度增加。

图1.检测膜联蛋白V-iFluor 488和磷脂酰丝氨酸在Jurkat细胞中的结合活性。 Jurkat细胞在37℃,5%CO2培养箱中不用(蓝色)或用20μM喜树碱(红色)处理4-5小时,然后用Annexin V-iFluor 488染色30分钟。 使用FL1通道用FACSCalibur(Becton Dickinson)流式细胞仪测量膜联蛋白V-iFluor 488的荧光强度。

 

参考文献

Combined Treatments of Magnetic Intra-Lysosomal Hyperthermia with Doxorubicin Promotes Synergistic Anti-Tumoral Activity.
Authors: D Hajj Diab El, P Clerc, N Serhan, D Fourmy, V Gigoux
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In situ polymerizable hydrogel incorporated with specific pathogen-free porcine platelet-rich plasma for the reconstruction of the corneal endothelium
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Novel regulations of MEF2-A, MEF2-D, and CACNA1S in the functional incompetence of adipose-derived mesenchymal stem cells by induced indoxyl sulfate in chronic kidney disease
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Shear stress-induced alteration of epithelial organization in human renal tubular cells
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Targeting a G-protein-coupled receptor overexpressed in endocrine tumors by magnetic nanoparticles to induce cell death
Authors: Claire Sanchez, Darine El Hajj Diab, Vincent Connord, Pascal Clerc, Etienne Meunier, Bernard Pipy, Bruno Payré, Reasmey P Tan, Michel Gougeon, Julian Carrey
Journal: Acs Nano (2014): 1350--1363

 

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