Cell Meter 比色法WST-8细胞定量试剂盒

货号22771存储条件r/l
规格5000 Tests价格6240
Ex (nm)460Em (nm)
分子量溶剂
产品详细介绍


简要概述

简要概述

  1. 在96孔板中制备细胞(100 µL /孔)
  2. 每空加入10ul WST-8TM溶液
  3. 在37°C孵育1-4小时
  4. 监测OD = 460 nm处的吸光度

如果将WST-8TM溶液保存在4°C并避光,其稳定性可超过一年。 将其存放在<-20°C的温度下以便更长的存储时间。

 

操作步骤

细胞增殖和细胞毒性检测

  1. 在具有透明底部的组织培养微孔板中培养细胞(5000到10,000个细胞/孔板)。
  2. 将测试化合物添加到细胞中,并在37°C,5%CO2的培养箱中孵育,所需的时间根据具体实验而定(例如24、48或96小时)。 对于空白孔(不含细胞的培养基),添加相同量的测试化合物。 对于96孔板,建议的总体积为100 µL,对于384孔板,建议的总体积为50 µL。 注意:应单独评估每种细胞系,以确定增殖或细胞毒性诱导的最佳细胞密度。 对于增殖测定,使用较少的细胞; 对于细胞毒性测定,请使用更多的细胞。
  3. 向每个孔中加入10 µL /孔(96孔板)或5 µL /孔(384孔板)的WST-8TM溶液。
  4. 将板在37°C下孵育1-4小时,避光。 注意:孵育时间可能从30分钟到过夜,具体取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。
  5. 用吸光度板酶标仪在OD = 460 nm处监测吸光度的增加。

细胞计数检测

  1. 在具有透明底部的组织培养微孔板中准备细胞培养物。 对于96孔板,建议的总体积为100 µL;对于384孔板,建议的总体积为50 µL。 注意:我们在透明的底部96孔板中使用了连续稀释的HeLa和Jurkat细胞悬浮液进行测定。
  2. 向每个孔中加入10 µL /孔(96孔板)或5 µL /孔(384孔板)的WST-8TM溶液。
  3. 将板在37°C下孵育1-4小时,避光。 注意:孵育时间可能从30分钟到过夜,具体取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。
  4. 使用吸光度板读数器在OD = 460 nm处监测吸光度的增加。

 

数据分析

从空白标准孔获得的读数(Abs(460 nm))用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值即可得到基线校正值。 然后,绘制标准读数,以获得标准曲线和方程式。 该方程式可用于计算细胞数/孔样品。 我们建议您使用在线线性回归计算器,该计算器可在以下网址找到:https://www.aatbio.com/tools/linear-logarithmic-semi-log-regression-online-calculator

 

参考文献

miR-218 inhibits the proliferation of human glioma cells through downregulation of Yin Yang 1
Authors: Yong Gao, Laisheng Sun, Zicheng Wu, Chengmin Xuan, Junxia Zhang, Yongping You, Xincheng Chen
Journal: Molecular Medicine Reports (2017)



说明书
Cell Meter 比色法WST-8细胞定量试剂盒.pdf